[发明专利]一种微胶囊化双歧杆菌的制备方法无效
| 申请号： | 200910136517.2 | 申请日： | 2009-05-06 |
| 公开（公告）号： | CN101597604A | 公开（公告）日： | 2009-12-09 |
| 发明（设计）人： | 储一衫;任发政;张明;杨海莺;赵亮;刘晓飞 | 申请（专利权）人： | 任发政 |
| 主分类号： | C12N11/04 | 分类号： | C12N11/04;B01J13/02;C12R1/01 |
| 代理公司： | 暂无信息 | 代理人： | 暂无信息 |
| 地址： | 100083北京市海淀区清华东*** | 国省代码： | 北京;11 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 微胶囊 化双歧 杆菌 制备 方法 | ||
1、一种微胶囊化双歧杆菌的制备方法，其特征在于，制备方法为：
(1)将长双歧杆菌BBMN68(保藏于中国农业大学)传代两次恢复活力，镜检菌株形态，将活化菌株以107cfu/mL接种于MRS培养基，厌氧培养24h。
(2)将(1)得到菌液4000rpm，10min离心得到菌体，收集菌泥。
(3)配制20％～40％的脱脂乳，62℃，30min巴氏杀菌，冷却后取出28g与离心得到的双歧杆菌菌体混合，搅拌均匀。脱脂乳菌悬液中双歧杆菌的初始浓度大约为1-2×1010cfu/ml。
(4)将30g脱脂乳菌悬液冷却至4℃，加入200μl凝乳酶后4℃下静置。30min～120min后加入200μL10％(W/V)CaCl2。
(5)凝乳后，向混合物加入质量比为10∶1～2∶1的花生油，5℃下100rpm～1000rpm搅拌5min。之后将温度升至40℃，继续搅拌15min。当温度到达18-20℃时胶粒开始形成。500rpm 1min离心将胶粒从油相中分离出来。得到的沉淀用蒸馏水洗涤2次，得到微胶囊化双歧杆菌产品。
2、如权利要求1所述的微胶囊化双歧杆菌的制备方法，其特征在于，制备方法为：
(1)将长双歧杆菌BBMN68(保藏于中国农业大学)传代两次恢复活力，镜检菌株形态，将活化菌株以107cfu/mL接种于MRS培养基，厌氧培养24h。
(2)将(1)得到菌液4000rpm，10min离心得到菌体，收集菌泥。
(3)配制30％的脱脂乳，62℃，30min巴氏杀菌，冷却后取出28g与离心得到的双歧杆菌菌体混合，搅拌均匀。脱脂乳菌悬液中双歧杆菌的初始浓度大约为1-2×1010cfu/ml。
(4)将30g脱脂乳菌悬液冷却至4℃，加入200μl凝乳酶后4℃下静置。60min后加入200μL 10％(W/V)CaCl2。
(5)凝乳后，向混合物加入质量比为5∶1的花生油，5℃下750rpm搅拌5min。之后将温度升至40℃，继续搅拌15min。当温度到达18-20℃时胶粒开始形成。500rpm 1min离心将胶粒从油相中分离出来。得到的沉淀用蒸馏水洗涤2次，得到微胶囊化双歧杆菌产品。
3、一种微胶囊化的双歧杆菌，其特征在于是由如权利要求1-2中任一种制备方法制得的。
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