[发明专利]角膜中期保存液

说明书

技术领域

本发明涉及一种角膜中期保存液。 

背景技术

现有角膜的活性保存方法，根据保存时间的不同，可分为短期保存、中期保存和长期保存。短期保存是将全眼球消毒杀茵处理后，在湿房4℃条件下保存，此方法的优点是方法简便，有效可行，尤其适合于基层医院开展角膜移植。缺点是保存时间较短，一般都在48小时内有效，有时因不能及时找到患者，材料已过期而弃用。长期保存是将角膜片经特殊处理后在-196℃的液氮中冷冻保存。冷冻保存的最大优点是为临床随时提供优质活性角膜，但是这种方法需特殊设备，技术难度高。中期保存一般采用角膜片组织保存液4℃保存，这一方法不仅可以提供较高质量的角膜，而且使角膜移植手术在时间安排方面得以改善。目前，最常用的几种角膜中期保存液是K-SOK，CSM，Dexsol和Optisol。这些保存液基本功能相似，但组成的成份及浓度不同。它们存在一个共同的问题是：它们都进口产品，其价格昂贵。近年来，为了向社会提供物美价廉的角膜中期保护液，我国学者在这方面作了不少研究，如中国专利文献CN1162389、CN1262866和CN1631138所公开的角膜保存液均较好地解决了这个问题。 

发明内容

本发明的目的是克服上述问题，向社会提供一种新的物美价廉的角膜中期保护液。 

本发明的技术方案是：提供一种角膜中期保存液，其是以1000ml的保存液中含有：DMEM培养基0.5-1.5g，羟丙基甲基纤维素1-10g，2-巯基乙 醇0.1-10ml，右旋糖苷(分子量40000)10-20g，非必需氨基酸1-3ml，Hepes缓冲液10-32mmol，地塞米松0.01-0.05mmol，庆大霉素50-70mg；该保存液的pH值为7.2-8.0，渗透压为350-400mmol/LH₂O。 

所述庆大霉素50-70mg可用50-70mg链霉素代替。 

所述庆大霉素50-70mg可用20-40mg链霉素和庆大霉素20-40mg代替。 

本发明由DMEM培养基，羟丙基甲基纤维素，2-巯基乙醇，右旋糖苷，非必需氨基酸等成份加蒸馏水配制而成。它不同于其它角膜中期保存液，其中羟丙基甲基纤维素可以保护角膜不受外力的伤害，而且羟丙基甲基纤维素本身是一种惰性物质，可以降低细胞代谢速度，对细胞无毒害作用，可以提高胶体渗透压；2-巯基乙醇对细胞生长有很重要的作用，它相当于胎牛血清，有直接刺激细胞的增殖作用，2-巯基乙醇的活性部分能使保存液中氧化的谷胱甘肽成为还原型谷胱甘肽，从而诱导细胞增殖。本发明由于采用了价格比较低廉的羟丙基甲基纤维素和2-巯基乙醇，使得本发明不仅具有好的角膜保存质量，同时还具有优良的性价比的优点，是一种广泛适用于国内外眼库使用的角膜中期保存液。 

附图说明

图1是本发明角膜中期保存液保存5d的人角膜内皮细胞台盼蓝-茜素红染色×100。 

图2是Optisol-GS液保存5d的人角膜内皮细胞台盼蓝-茜素红染色×100。 

图3是本发明角膜中期保存液保存8d的人角膜内皮细胞台盼蓝-茜素红染色×100。 

图4是Optisol-GS液保存8d的人角膜内皮细胞台盼蓝-茜素红染色×100。 

图5是本发明角膜中期保存液保存14d的人角膜内皮细胞台盼蓝- 茜素红染色×100。 

图6是Optisol-GS液保存14d的人角膜内皮细胞台盼蓝-茜素红染色×100。 

图7是本发明角膜中期保存液保存8d的人角膜组织切片。 

图8是本发明角膜中期保存液保存14d的人角膜组织切片。 

图9-图10是本发明角膜中期保存液保存10d的人角膜内皮细胞中央及周边扫描电镜观察×1000。 

图11-图12是Optisol-GS液保存10d的人角膜内皮细胞中央及周边扫描电镜观察×1000。 

图13是本发明角膜中期保存液保存14d的人角膜内皮细胞扫描电镜观察×1000。 

图14是Optisol-GS液保存14d的人角膜内皮细胞扫描电镜观察×1000。 

图15是本发明角膜中期保存液保存14d的人角膜内皮细胞透射电镜观察×5200。 

图16是Optisol-GS液保存14d的人角膜内皮细胞透射电镜观察×5200。 

具体实施方式