[发明专利]一种治疗肿瘤的药物及其应用

权利要求书

1.一种聚乙二醇与血管内皮抑制素通过共价键偶联形成的复合 物，其中血管内皮抑制素与聚乙二醇偶联的位点是血管内皮抑制素的 赖氨酸残基侧链的ε-氨基，所述复合物具有比血管内皮抑制素更长 的体内半衰期。

2.权利要求1的复合物，所述聚乙二醇是单甲基聚乙二醇。

3.权利要求1或2的复合物，其特征为一个血管内皮抑制素分子 和一个或多个聚乙二醇分子偶联。

4.权利要求3的复合物，其特征为偶联的位点是野生型血管内皮 抑制素75、95、106、117、183位的赖氨酸残基侧链上的ε-氨基或 其组合。

5.权利要求1-4任一项的复合物，所述聚乙二醇分子是线性的或 是分叉的。

6.权利要求1-5任一项的复合物，所述聚乙二醇分子的平均分子 量位于1,000到100,000道尔顿之间。

7.权利要求6的复合物，所述聚乙二醇分子的平均分子量位于 5,000到40,000道尔顿之间。

8.权利要求1-7任一项的复合物和生物相容的物质形成的缓释制 剂。

9.权利要求8的缓释制剂，所述的缓释制剂选自微胶囊、水凝胶、 微球、微型渗透泵或脂质体。

10.权利要求1-7任一项中的复合物以及权利要求8或9的缓 释制剂，其中血管内皮抑制素是人、鼠、或其他哺乳动物来源的。

11.权利要求1-7任一项中的复合物以及权利要求8或9的缓 释制剂，其中血管内皮抑制素是野生型的人血管内皮抑制素，其天然 形式具有SEQ ID NO.1所示的序列。

12.权利要求1-7任一项中的复合物以及权利要求8或9的缓 释制剂，其中所述血管内皮抑制素当由大肠肝菌表达时，其野生型的 人血管内皮抑制素具有SEQ ID NO.2的序列，其中N末端的Met 在大肠肝菌表达时被部分删除。

13.权利要求1-7任一项中的复合物以及权利要求8或9的缓 释制剂，其中聚乙二醇偶联于血管内皮抑制素的具有活性的片段或衍 生物。

14.权利要求13中的复合物或缓释制剂，其中血管内皮抑制素 片段是具有SEQ ID NO.3、SEQ ID NO.4、或SEQ ID NO.5序 列的肽链。

15.权利要求13中的复合物或缓释制剂，其中血管内皮抑制素 衍生物是在野生型血管内皮抑制素的N端或C端附加一段长度为 1-15个氨基酸的肽链形成的。

16.权利要求15中的复合物或缓释制剂，其中血管内皮抑制素 衍生物是在野生型人血管内皮抑制素的N端附加一段9个氦基酸组 成的含有His-tag的肽链MGGSHHHHH，该衍生物具有SEQ ID No.6 的序列，当由大肠杆菌表达时其N末端的Met被部分删除。

17.权利要求1-16中任一项的含有血管内皮抑制素的复合物或 缓释制剂与药学上可接受的载体形成的药物组合物。

18.一种试剂盒，其包含权利要求1-17的含有血管内皮抑制素 的复合物、缓释制剂或药物组合物和使用说明。

19.制备权利要求1-7中的含有血管内皮抑制素的复合物的方 法，其特征是用活化的聚乙二醇与血管内皮抑制素混合，在适当的溶 液、温度、pH、摩尔比下反应。

20.权利要求19的方法，其中pH为pH 3-10。

21.制备权利要求1-7中的含有血管内皮抑制素的复合物的方 法，其特征是将偶联产物用阳离子柱纯化。

22.制备权利要求1-7中的含有血管内皮抑制素的复合物的方 法，其特征是将偶联产物用分子筛纯化。

23.权利要求1-7的含有血管内皮抑制素的复合物在制备用于 预防、诊断或治疗肿瘤的药物中的用途。