[发明专利]一种高效香蕉胚性愈伤诱导和继代增殖再生的方法

权利要求书

1.一种香蕉胚性愈伤组织诱导和继代增殖再生的方法，其特征 在于：包括诱导脱分化愈伤组织的培养过程、诱导易碎胚性愈伤组织 的培养过程、易碎胚性愈伤组织的继代增殖过程、胚性愈伤组织的诱 导成胚过程、成熟胚诱导成苗过程；

1)诱导脱分化愈伤组织的培养过程

选取香蕉刚出土的无病幼嫩吸芽，经表面处理后，剥取顶芽切成 厚1～2mm，长宽0.5～1cm的薄片，接种到脱分化愈伤组织诱导培养 基上进行暗培养得到白色脱分化愈伤组织，培养温度为25～30℃， 培养时间20～30天；所述脱分化愈伤组织诱导培养基是以MS培养基 为基础培养基，激素为0.5～4ppm 2、4-D、0～1ppm IAA、0～1ppm NAA和0～0.5ppm ZT，并添加谷氨酸50～100mg/L，Vc0.05～0.5mg/L， PH 5.3～5.8；

2)诱导易碎胚性愈伤组织的培养过程

将经脱分化愈伤诱导过程产生的白色脱分化愈伤组织，接到胚性 愈伤组织诱导培养基上进行暗培养即能从脱分化愈伤上再生黄色松 散的易碎胚性愈伤组织，培养温度为24～28℃，培养时间40～50天； 所述胚性愈伤组织诱导培养基是以MS培养基为基础培养基，其中大 量元素减少20～50％，微量元素增加1～3倍，激素为0.2～2ppm 2、 4-D、0～0.5ppm ZT和0～4ppm Picloram，并添加糖40g/L、谷氨 酸50～100mg/L，Vc0.05～0.5mg/L，PH 5.3～5.8；

3)易碎胚性愈伤组织的继代增殖过程

将易碎胚性愈伤组织接到继代增殖培养基上进行暗培养，可对易 碎胚性愈伤组织进行继代和增殖，培养温度为26～30℃，每20～30 天继代一次；所述继代增殖培养基是以MS培养基为基础培养基，其 中微量元素增加1～3倍，激素为0.2～2ppm 2、4-D、0～1ppm NAA、 0～0.5ppm ZT和0～4ppm Picloram，并添加糖40g/L、谷氨酸50～ 100mg/L、Vc0.05～0.5mg/L，PH 5.3～5.8；

4)胚性愈伤组织的诱导成胚过程

将继代增殖的胚性愈伤组织接到胚诱导培养基上进行暗培养，诱 导形成成熟胚，培养温度为25～28℃，每15～20天继代一次；所述 胚诱导培养基是以MS培养基为基础培养基，其中大量元素减少20～ 50％，微量元素增加1～3倍，激素为0～2ppm 2、4-D、0.2～0.5ppm ZT、0～3ppm TDZ和0～0.5ppm GA3，并添加糖20g/L、谷氨酸50～ 100mg/L、Vc0.05～0.5mg/L，PH 5.3～5.8；

5)成熟胚诱导成苗过程

挑取经诱导成胚过程的成熟胚，接到成苗培养基上进行培养能逐 步诱导成苗，培养温度为26～30℃，光照时间为16h，光照强度为 1000lx，每20～30天继代一次；所述成苗培养基是以MS培养基为 基础培养基，激素为0～0.5ppm NAA和1～5ppm 6-BA，并添加糖 30g/L，PH 5.3～5.8。