[发明专利]基因rab13的拮抗剂的应用及包含该拮抗剂的药物

说明书

技术领域

本发明涉及基因rabl3(SEQ ID NO.：1)的拮抗剂在制备用于抑制肿瘤细胞增殖和促进肿瘤细胞凋亡或者用于增强抗肿瘤药疗效的药物中到应用。本发明也涉及包含该拮抗剂的用于抑制肿瘤细胞增殖和促进肿瘤细胞凋亡或者用于增强抗肿瘤药疗效的药物。

背景技术

现在已知ras、rab亚家族的许多成员在肿瘤的发生和发展中起了一个促进作用，是潜在的癌基因。如rab2与白血病的发病有关，在白血病中高表达；rab7、8与黑色素瘤有关，在黑色素瘤中高表达；rab11在食管癌细胞的囊泡运输中不正常而可能导致了食管癌的发生；rab25在上皮来源的乳腺癌和卵巢癌的发生发展及侵袭性方面都起了重要作用，特别在乳腺癌和卵巢癌III、IV表达异常增高，它明显促进了肿瘤细胞的增殖，抑制了凋亡和失巢凋亡。

肿瘤的发生是一个多阶段、多步骤的过程，这一过程中伴随着机体许多的细胞学、遗传学的改变，出现多种基因表达异常，包括癌基因的激活和/或抑癌基因灭活，激发异常的信号传导通路，导致细胞周期及细胞凋亡异常，从而使得细胞恶性转化，并随着各种分子异常的累积，肿瘤出现进展、转移。因此，了解这些在肿瘤发生过程中、在肿瘤组织中起了重要作用的基因，对于肿瘤发生发展机制的阐明、寻找新的肿瘤治疗靶标具有重要意义。

由于rab家族的一些成员是潜在的癌基因，已有的实验结果表明在体内和体外采用基因沉默或敲除的方法。均可以抑制肿瘤细胞的增殖和生长，因而就提出了一种新式治疗靶标，我们可以把这些潜在的癌基因作为肿瘤治疗的新靶标。Genbank(http://www.ncbi.nlm.nih.gov/Genbank/index.html)中公开了一种基因rabl3(Gene ID：285282)(SEQ ID NO.：1)及其所编码的蛋白质(GI：627514717)(SEQ ID NO.：2)。但是迄今为止，并没有文献报道该基因在治疗肿瘤方面的功能。

发明内容

本发明的目的是提供基因rabl3(SEQ IDNO.：1)的拮抗剂在制备用于抑制肿瘤细胞增殖和促进肿瘤细胞凋亡或者用于增强抗肿瘤药疗效的药物中的应用。

本发明的另一个目的是提供包含该拮抗剂的用于抑制肿瘤细胞增殖和促进肿瘤细胞凋亡或者用于增强抗肿瘤药疗效的药物。

为了达到该目的，本发明提供了如下的技术方案：本发明的基因rabl3(SEQ IDNO.：1)可以作为肿瘤治疗的靶标，也就是说基因rabl3的拮抗剂可以用于制备用于抑制肿瘤细胞增殖和促进肿瘤细胞凋亡或者用于增强抗肿瘤药疗效的药物。同时，本发明也提供了一种用于抑制肿瘤细胞增殖和促进肿瘤细胞凋亡或者用于增强抗肿瘤药疗效的药物，其包含基因rabl3的拮抗剂。

本发明人通过实验发现在肿瘤细胞中，抑制和敲除rabl3基因的表达，可以抑制肿瘤细胞的增殖，促进肿瘤细胞发生凋亡，增加肿瘤细胞对抗癌药的敏感性；反之，在肿瘤细胞中转染基因rabl3则可以促进肿瘤细胞的增殖和存活，出现对抗癌药抵抗。

并且通过本发明后面的实施例及本领域的公知常识可以知道，针对基因rabl3的任何拮抗剂都可以用于本发明的目的。例如，所述拮抗剂可以是抑制mRNA翻译的反义RNA。本领域技术人员已知反义RNA是指与mRNA互补的RNA分子。由于核糖体不能翻译双链的RNA，所以反义RNA与mRNA特异性的互补结合，即抑制了该mRNA的翻译。另外，最近几年已经成熟的siRNA也可以作为本发明所述的拮抗剂，所述siRNA是由双链RNA来降解mRNA，从而抑制mRNA转录后的翻译，使得相应基因沉默(post-transcriptional gene silencing，PTCG)的一项技术。2001年Elbashir等《Nature》上首次报道通过21个核苷酸的siRNA成功地在哺乳动物培养细胞中诱导特异性基因沉默。随后，在小鼠等多种细胞中也取得了成功。对于哺乳动物细胞来说，外源倒入的ds RNA长度超过30bp时，会引起非特异性的mRNA降解。

可以根据本发明的核酸序列设计一段ds DNA序列合成小双链干扰的RNA或将ds DNA序列连接到载体中，构建干扰RNA的载体，载体进入细胞，利用体内的环境转录获得拮抗剂siRNA序列，使得Rabl3基因沉默而达到治疗肿瘤的目的。

本发明所述的siRNA分子含有第一链和第二链，第一链包含对应于基因rabl3核苷酸序列的核糖核苷酸序列，第二链包含与基因rabl3核苷酸序列互补的核糖核苷酸序列。