[发明专利]具有改变的特性的变体

权利要求书

1.亲代Termamyl样α-淀粉酶的变体，其在选自下组的一个或多个位置 处包含改变：

R28，R118，N174，R181，G182，D183，G184，G186，W189，N195，M202， Y298，N299，K302，S303，N306，R310，N314；R320，H324，E345，Y396，R400， W439，R444，N445，K446，Q449，R458，N471，N484，

其中

(a)所述每一改变是

(i)在占据此位置的氨基酸下游插入氨基酸，

(ii)占据此位置的氨基酸的缺失，或

(iii)占据此位置的氨基酸用另一氨基酸取代，

(b)所述变体具有α-淀粉酶活性，且

(c)每一位置对应于具有SEQ ID NO：12所示AA560之氨基酸序列的亲 代Termamyl样α-淀粉酶氨基酸序列的位置。

2.权利要求1的变体，其包含一个或多个如下突变：ΔG184； Δ(R181-G182)；Δ(D183-G184)；R28N，K；S94K；R118K；N125A，R，K；N174D； R181Q，E，K；G186R；W189R，K；N195F；M202L；Y298H，F；N299A；K302R； S303Q；N306G，D，R，K；R310A，K，Q，E，H，D，N；N314D；R320K；H324K； E345R，D，K，N；Y396F；R400T，K；W439R；R444K；N445K，Q；K446N；Q449E； R458K；N471E；N484Q。

3.权利要求1-2的变体，其中该变体进一步包含在M202处的一个突变， 特别是M202L，T。

4.权利要求1-3的变体，其中该变体进一步包含在N195处的一个突变， 特别是N195F。

5.权利要求1-4的变体，其中该变体进一步包含在G186处的一个突变， 特别是G186R。

6.权利要求1-5的变体，其中该变体进一步包含在R181处的一个突变， 特别是R181Q。

7.权利要求1-6中任一项的变体，其中所述亲代Termamyl样α-淀粉酶 衍生自地衣芽孢杆菌，解淀粉芽孢杆菌，嗜热脂肪芽孢杆菌，芽孢杆菌NCIB 12289，NCIB 12512，NCIB 12513或DSM 9375，或DSMZ 12649，KSM AP1378， 或KSM K36或KSM K38。

8.权利要求1-7的变体，其中所述亲代Termamyl样α-淀粉酶是选自SEQ ID NO：2，4，6，8，10，12和13所示α-淀粉酶中的任何一种。

9.权利要求1-8中任一项的变体，其中所述亲代Termamyl样α-淀粉酶 的氨基酸序列与SEQ ID NO：4的序列至少有60％的同一性，优选70％，更 优选至少80％，甚至更优选至少约90％，甚至更优选至少95％，甚至更优选 至少97％，甚至更优选至少99％。

10.权利要求1-9中任一项的变体，其中所述亲代Termamyl样α-淀粉酶 由一种核酸序列编码，该核酸序列在低严紧条件下，优选在中等严紧条件 下，优选在高严紧条件下与SEQ ID NO：11的核酸序列杂交。

11.权利要求1-10的变体，该变体具有改变的溶解度，优选具有增加的 溶解度，特别是在洗涤，餐具洗涤或硬表面清洁的条件下具有增加的溶解度。

12.一种DNA构建体，其包含编码权利要求1-11中任一项的α-淀粉酶 变体的DNA序列。

13.一种携带权利要求12的DNA构建体的重组表达载体。

14.一种用权利要求9的DNA构建体或权利要求10的载体转化的细胞。