[发明专利]一种抗异质性及多因性老年痴呆药物筛选模型的建立及应用

说明书

技术领域

本发明涉及一种抗异质性及多因性老年痴呆药物筛选模型的建立及应用。

背景技术

老年痴呆发病机制和病变过程是复杂的，现有的每一种动物模型仅在一定程度上或某些方面模拟了老年痴呆动物的症状和病理改变。要寻找一种能够完全模拟老年痴呆全部临床和病理特征的动物模型极为困难，从经济上讲也没有必要。由于在临床痴呆人群中，混合性痴呆具有较高的流行趋势，使得人们将老年性痴呆(Alzheimer Disease，AD)与血管性痴呆(Vascular Dementia，VD)结合起来。而与之相关的AD及VD痴呆动物模型制作一直是该领域的难点及热点之一，现有的模型制备往往将两者严格区分开来，而且大多只针对疾患病理特征的某一方面(即模拟诸多病理变化中的某一个方面)，而忽视了老年期痴呆的异质性及多因性。目前发现衰老及脑低灌注状态是AD及VD发病过程中不可缺少的两大主要因素，而淀粉样蛋白(amyloid β-protein，Aβ)是老年斑的主要成分，也是AD的病理特征之一。本发明拟从AD和VD发病的多因性及相似性出发，尝试将脑衰老及血管危险因子(心脏病、中风、高血压、低血压、动脉粥样硬化和短暂性脑缺血发作等)导致的脑低灌注和脑病理病变等相结合，利用腹腔注射半乳糖促老化与反复结扎双侧颈总动脉致脑低灌注及大鼠侧脑室一次性注射β淀粉样蛋白4nmol制作痴呆模型的方法，为老年期AD、VD及混合性痴呆的发病机制和相关药物疗效研究提供一种学习、记忆功能减退老龄大鼠模型，并通过Morris水迷宫对该模型大鼠的学习记忆和空间探索能力等行为学及应用脑生理、病理形态学、免疫组织化学等方法对该模型大鼠发病机理进行有效性评价，证实此模型具有涉及多层面、多途径、多靶点的整体调节作用特点，是一种符合中医药特色的、有效的、发病机理相对明确的并能够适用于抗异质性及多因性老年痴呆药物(包括中药、天然药物、有效部位及单体化合物)的筛选模型。

发明内容

本发明的目的在于提供一种抗异质性及多因性老年痴呆药物筛选模型的建立及应用，它是一种符合中医药特色的、有效的、发病机理相对明确的并能够适用于抗异质性及多因性老年痴呆药物(包括中药、天然药物、有效部位及单体化合物)的筛选模型。

本发明是这样来实现的，其特征是模型建立的方法为：选取若干只大鼠，分别给予50mg/kg·d的D-gal腹腔注射，造成亚急性衰老，4W后先进行双侧颈总动脉反复结扎，造成脑缺血性病灶，用水合氯醛360mg/kg腹腔注射麻醉大鼠，颈正中部常规消毒后切口，分离双侧颈总动脉，套丝线扣，拉紧丝扣，阻断血流10min，松开丝扣使血液灌注10min后，再次阻断血流10min，第2次再灌后观察5min，缝合皮肤，切口局部注射庆大霉素，各组反复结扎双侧颈总动脉阻断血流，手术完成后，将大鼠喂养3天，取未死亡的状态良好的大鼠再脑内注射用无菌生理盐水稀释成5μg/μl的Aβ_1-4037℃孵育1W。

本发明应用在该模型适用于中药、天然药物、有效部位及单体化合物分别对老年痴呆病人认知功能的短期维持治疗的药物筛选；延缓或预防老年痴呆疾病的药物筛选；治疗老年痴呆病人的行为问题的药物筛选。

本发明的优点是：通过该模型为老年期AD、VD及混合性痴呆的发病机制和相关药物疗效研究提供一种学习、记忆功能减退老龄大鼠损伤模型，此模型可以反映老年痴呆病人真实的脑病理损伤状态。

具体实施方式

1老年痴呆模型的建立

1.1实验分组

将55只健康的Wistar大鼠随机分成3组：空白组、假损伤组、模型组。空白组15只，实验组每组20只。

1.2造模方法