[发明专利]3-羰基-20α-羟基-24-烯-达玛烷化合物的抗肿瘤用途

说明书

所属技术领域

本发明涉及一种三萜类化合物的抗肿瘤用途，具体涉及3-羰基-20α-羟基-24-烯-达玛烷化合物抑制胃癌细胞SGC-7901和肝癌细胞BEL-7404的用途。

背景技术

本发明使用的3-羰基-20α-羟基-24-烯-达玛烷化合物由药用植物三七提取获得，其化学结构式如下：

三七是中国的特有药用植物，且仅产于我国的西南部，当地民间发掘使用源远流长。中医学认为，三七性温味甘微苦，入肝、胃、大肠诸经，可治疗各种出血症。三七，这一被人们认识晚于人参1000年的后起之秀，享有“中药之最珍贵者”的美誉。

三七(Panax Notoginseng)为五加科植物，干燥的根入药，又称田七、岑三七等，主产于云南、广西等地。其主要药理活性成分为人参皂苷和独有的三七皂苷R₁，R₂等。主要功用为化淤止血，消肿止痛。三七作为抗凝剂在心脑血管疾病方面的研究比较多，近年来发现三七具有多种抗肿瘤活性，其中包括对肿瘤细胞的直接抑制作用(尚西亮等.三七总皂苷对人肝癌细胞的抑制作用.中国临床康复，2006，10(23)：121；吴映雅等.三七总皂苷丹参注射液苦参碱对大鼠肝癌细胞CBRH-791生长的抑制作用.辽宁中医杂志，2005，32(10)：1010；李晓红等.三七皂苷对NB4细胞促凝活性及诱导分化的影响.中国中西医结合杂志，2004，24(1)：63；王志斌等.三七提取物对GES-1细胞及MNNG转化后GES-1细胞增殖的抑制作用.中西医结合学报，2004，2(6)：445；黄清松等.三七皂苷Rg1抗突变和抗肿瘤研究短篇论著.临床和实验医学杂志，2006，5(8)：1124)、促癌细胞凋亡(黄清松等.三七皂苷Rg1抗突变和抗肿瘤研究短篇论著.临床和实验医学杂志，2006，5(8)：1124；王国俊等.三七皂苷R₁诱导HL260细胞凋亡的初步研究.四川生理科学杂志，2004，26(1)：14；Darzynekiewicz Z et al.Featuresof apoptotic cell measured by flow cytometry.Cytometry.1992，3(8)：795；李军祥等.三七提取物对MNNG转化后GES-1细胞的促凋亡作用.中西医结合学报，2005，3(2)：123)、诱导癌细胞分化、逆转肿瘤细胞多药耐药(张晓丽等.P-糖蛋白多药耐药机制及其逆转剂的研究进展.中国医学文摘-肿瘤学，2005，19(2)：147；史曦凯等.人参皂苷单体Rb1对多药耐药细胞系K562/HHT的耐药逆转作用.第三军医大学学报，1999，21(11)：825)及抗肿瘤转移(许军等.三七总皂苷干预血栓形成研究概况.云南中医中药杂志，2003，24(5)：46；倪启超等.结直肠癌肝转移临床与实验的防治研究.南通医学院学报，2004，24(1)：5)等方面。近年来，已报道的有关三七中分离到的化合物抗肿瘤活性研究的文献未见以三萜类化合物作用于胃癌细胞系SGC-7901和肝癌细胞系BEL-7404的抗肿瘤活性作用及诱导凋亡的反应的报道。

发明内容

本发明的目的是将3-羰基-20α-羟基-24-烯-达玛烷化合物应用于抑制癌细胞，具体用于抑制胃癌细胞系SGC-7901和肝癌细胞系BEL-7404的细胞增殖。

本发明使用的3-羰基-20α-羟基-24-烯-达玛烷化合物(以下简称化合物A)，以药用植物三七(Panax Notoginseng)为原料提取获得，制备方法如下：

称取三七(Panax Notoginseng)块根5kg，粉碎后用70％乙醇回流提取3次，滤去不溶物，蒸干提取液，将浸膏悬乳分散在冷水中，浸膏分为水溶性和脂溶性两部分。取脂溶性提取物经洗脱液石油醚-丙酮(10∶3)，过200-300目的硅胶柱；然后，经洗脱液正己烷-丙酮(10∶1)反复硅胶(10-40μm)分离，最后通过HPLC分离，得到化合物A。

1.化合物A的抗肿瘤活性检测方法：

(1)称取化合物A 2mg，用DMSO预溶，加入生理盐水溶解至供试浓度，抽滤后备用。所述供试浓度分别为：100μg/mL，50μg/mL，25μg/mL，12.5μg/mL，6.25μg/mL，3.13μg/mL，1.65μg/mL，0.83μg/mL，0.42μg/mL。

(2)根据MTT法检测化合物A对胃癌细胞系SGC-7901和肝癌细胞系BEL-7404的抑制活性。