[发明专利]含呋喃唑酮代谢物3-氨基-2-唑酮(AOZ)的鳗鲡肌肉冻干粉基体标准物质的制备

说明书

技术领域

本发明属于化学技术领域，更具体涉及一种含呋喃唑酮代谢物3-氨基-2-唑酮(AOZ)的鳗鲡肌肉冻干粉基体标准物质的制备方法。 

背景技术

呋喃唑酮属硝基呋喃类药物，动物服用呋喃唑酮后，原药分子在动物体内迅速代谢，其在体内的稳定性不超过几小时，代谢的部分化合物分子与细胞膜蛋白结合成为结合态，结合态可长期保持稳定，从而延缓原药在体内的清除速度。而普通的食品加工方法(如烧烤、微波加工、烹调等)难以使蛋白结合态呋喃唑酮残留物大量降解，食用含有该残留物的肉制品会对人体产生一定的毒副作用。研究表明，蛋白结合态的呋喃唑酮残留物含有称为3-氨基一2-唑酮(AOZ)的完整侧链，在人胃的弱酸性条件下，侧链可以从蛋白结合态的母体分子上解离下来，AOZ可以代谢成为0一轻乙基麟，该代谢物是致突变和致癌化合物。 

在兽药残留分析中，样品基体涉及到各种动、植物及加工食品。分析基体本身的差别使得在分析过程中不能简单地采用传统的纯品标准物质来校准或进行质量控制，需要采用基体标准物质两类标准物质以满足要求，包括证明检测工作与所要求的标准操作程序相符或参加能力验证中、校准仪器、用于质量控制、解决分析中遇到的问题以及保证结果的准确。欧洲委员会对标准物质有明确定义，欧盟有关农、兽药残留检测的法规性文件均提到了要采用标准物质作为质量控制手段，对检测方法进行验证；因此标准物质对于兽药残留分析是十分重要的。 

发明目的 

本发明的目的是提供一种含呋喃唑酮代谢物3-氨基-2-唑酮(AOZ)的鳗鲡肌肉冻干粉基体标准物质的制备方法，制备科学合理，可操作性强，制备得到的基体标准物质不需冷冻可在室温条件下长期保存，可作为实物标样在日常检测工作中用于建立分析方法、确定实验准确度与精密度及在检测质量控制，运用方便广泛，品质好。 

本发明的含呋喃唑酮代谢物3-氨基-2-唑酮(AOZ)的鳗鲡肌肉冻干粉基体标准物质的制备步骤为： 

1)将含有浓度约5～7μg/kg左右呋喃唑酮代谢物AOZ的鳗鲡肌肉组织按约1∶4重量比例加入不含呋喃唑酮代谢物AOZ的鳗鲡肌肉组织，匀浆； 

2)组织匀浆后的鱼浆进行低温冷冻干燥、第一次粉碎； 

3)粉碎后的产物进行脱脂、二次粉碎均质，混匀，过筛后成所述的含呋喃唑酮代谢物3-氨基-2-唑酮(AOZ)的鳗鲡肌肉冻干粉基体标准物质。 

本发明的显著优点：本发明获得的基体标准物质本发明采用含呋喃唑酮代谢物3-氨基-2-唑酮(AOZ)的鳗鲡肌肉为原料，制备科学合理，可操作性强，制备得到的基体标准物质不需冷冻可在室温条件下长期保存，可作为实物标样在日常检测工作中用于建立分析方法、确定实验准确度与精密度及在检测质量控制，运用方便广泛，品质好。 

附图说明

图1是本发明的制备流程图。 

图2是本发明实施例2的AOZ标准溶液(上)与鳗鲡肌肉冻干粉(下)的MRM色谱图。 

具体实施方式

制备步骤为： 

采用药浴给药呋喃唑酮的方式，使呋喃唑酮药物在鳗鲡体内代谢，对其代谢曲线进行测定，获得肌肉中呋喃唑酮代谢物AOZ浓度在约5～7μg/kg左右的鳗鲡，将鳗鲡宰杀、放血、去骨、去内脏，取得含有呋喃唑酮代谢物AOZ的鳗鲡肌肉；所述药浴给药呋喃唑酮为所述药浴给药呋喃唑酮约为0.16mg/L，全池泼洒方式药浴给药，养鳗池日换水率约95％，给药后第10小时开始采集样本，之后每24小时采集一次样本，每次取样随机取6条鳗鲡，宰杀、去皮、去骨，洗净，取肌肉一并匀浆作为一个样本进行检测。按GB/T21311-2007《动物源性食品中硝基呋喃类药物代谢物残留量检测方法高效液相色谱-串联质谱法》检测，同位素稀释内标法定量。用药15日后经检测取呋喃唑酮代谢至一平台，取全部鳗鲡，宰杀、去皮、去骨、洗净，待制备。 

将呋喃唑酮代谢物AOZ的浓度约5～7μg/kg左右的鳗鲡肌肉组织按约1∶4比例加入不含呋喃唑酮代谢物AOZ的鳗鲡肌肉组织，匀浆；将制得的样品按GB/T21311-2007《动物源性食品中硝基呋喃类药物代谢物残留量检测方法高效液相色谱-串联质谱法》检测AOZ含量，同位素稀释内标法定量。以方差检验法对匀浆的鱼浆进行均匀性检验； 

组织匀浆后的鱼浆进行低温冷冻干燥、第一次粉碎；低温冷冻干燥的条件为：样品先置于-70℃冰箱中预冻7个小时，取出于冷冻干燥机中冷冻干燥56小时后取出。