[发明专利]一种纯化爱啡肽的方法

说明书

技术领域

本发明属于HPLC技术领域，尤其是涉及一种规模化纯化爱啡肽(Eptifibatide) 的方法。

背景技术

爱啡肽，又名依非巴特、埃替非巴肽，英文名：Eptifibatide，分子式： C₃₅H₄₉N₁₁O₉S₂，CAS登录号148031-34-9，其结构为

Eptifibatide为抗血小板聚集剂，由美国COR Therapeutics公司与美国 Schering-Plough公司共同研制开发。1998年7月由Schering-Plough公司以商品 名Intrifiban在美国首次上市，1999年以商品名Intrifiban在欧洲上市。异名 IntrifibanTM，Sch-60936，C68-22，SB-1。

埃替非巴肽为环形肽，是血小板糖蛋白GPIIb/IIIa受体拮抗剂，可阻断由 各种激活剂引起的血小板聚集反应，是已知最强的特异性血小板聚集抑制剂， 主要用于防止心肌供氧动脉闭塞，心脏病发作，不稳定性心绞痛、无Q波心肌 梗塞、冠脉介入治疗引起的猝死。临床研究结果显示，病人推注埃替非巴肽进 行治疗，在术后48小时，死亡或严重问题的联合终点发生率(主要终点指标包 括：心脏病发作、病死率及需要再次急诊介入或溶栓治疗率)埃替非巴肽比其 他剂组减少了37％。死亡或心肌梗死发生率，埃替非巴肽组比其他剂组低40％。

Eptifibatide在急性冠脉综合征病人中呈剂量依赖性地抑制体外血小板的聚 集，在健康志愿者和做PCI术的病人中能抑制纤维原与二磷酸腺苷活化的血小 板结合。对急性冠脉综合征病人，二磷酸腺苷诱导的血小板聚集早在本品注射 后5分钟即受到抑制，其在给药期持续的4～8小时内恢复正常。本品180μg/kg 剂量静注和以每分钟2μg/kg速率静脉输注均能达到抑制血小板聚焦80％以上。

利用枸橼酸盐抗凝剂评价，本品抑制血小板聚焦作用较其它非螯合型抗凝 剂强2-4倍。本品可使急性冠脉综合征病人及进行PCI术病人的出血时间延长 2-4倍(与其基线值相比)，在停止输注本品后1小时内恢复正常。本品经大鼠、 兔和猴的安全性评价试验，未见毒性反应的迹象，给猴连续静脉输注28天，每 天剂量高达7.2mg/kg也未见毒性表现。

血小板糖蛋白GPIIb/IIIa受体拮抗剂代表了目前介入性心脏病学最大进展 之一。大规模、随机、对照临床试验已无可争议地确认了其在心脏病介入治疗 中的地位，它可大约减少患者围手术期缺血并发症50％～60％，而且，当肝素 使用剂量合适时可不明显增加出血事件发生率。

Eptifibatide适用于治疗急性冠脉综合征，包括不稳定型心绞痛或无Q波心 肌梗塞(既24小时内胸痛持续发作、心电图改变和/或心血管系统酶升高)；也 可用于经皮冠脉介入疗法，包括血管成形术或动脉粥样斑块切除术。一般不用 于无急性冠脉综合征的血管成形术。在专人监管下，本品可与阿司匹林或肝素 辅用。Eptifibatide的优点：①对血小板糖蛋白IIb/IIIa受体的阻滞是可逆的，一 旦出现不良反应可立即停药，不良反应轻。②选择性高，作用强。③本身几乎 无抗原性，不会引起过敏反应。但在已发表的文献和专利中，未发现有大规模 生产、并且具有较高收率的纯化工艺的报道或申请。

发明内容

本发明的目的在于提供一条适于产业化纯化亮丙瑞林的工艺方法，使用反 相高效液相色谱法结合阴离子交换法转盐纯化爱啡肽，纯度高且收率好，达到 产业化要求，解决现有技术存在的缺陷。

为实现上述目的，本发明采取如下技术方案：

一种纯化爱啡肽的方法，包括以下步骤：

1)：用装有硅藻土的布氏漏斗进行抽滤以除去难溶性杂质；

2)：用固定相为烷基硅烷键合硅胶，流动相包括A相和B相，所述的A相 为三氟醋酸水溶液、B相为色谱纯乙腈，进行梯度洗脱纯化；收集目的峰值的肽 溶液减压旋蒸浓缩；

3)：用阴离子交换法把三氟醋酸盐转成醋酸盐而得到符合要求的醋酸爱啡 肽原料药。

优选的方案是：所述的步骤1)中装有硅藻土的厚度为2-3cm。

更为优选的方案是：所述的步骤2)中三氟醋酸水溶液浓度为0.1％；所述 的梯度洗脱的B相为15％～30％；检测波长为280nm。