[发明专利]一种参麦注射液中5-羟甲基糠醛的定量测定方法

说明书

技术领域

本发明涉及一种中药制剂中有害成分的检测及定量分析方法。具体的说，是一种对参麦注射液中所含5-羟甲基糠醛进行检测和定量的方法。

背景技术

5-羟甲基糠醛(5-(Hydroxymethyl)-2-furaldehyde，5-HMF)是葡萄糖或者果糖在高温或酸性等条件下脱水产生的一个醛类化合物，存在于焦糖、酒类、酱油、咖啡、葡萄干、乳制品、蜂蜜、某些天然产物和杀虫剂中。研究认为5-HMF对眼、粘膜、皮肤有刺激性，能与人体蛋白质结合产生蓄积中毒，造成动物横纹肌麻痹和内脏损害，并且具有神经毒性，且有报道称其存在潜在的遗传及生殖毒性等；研究发现5-HMF能促进导致结肠小囊的产生，并呈剂量依赖性。并认为5-HMF可能会产生一定程度的基因毒性，其机制为5-HMF在体内经硫化和氯化的过程产生致突变作用。因此各国对食品、饮料和环境中的5-HMF限定都比较严格。从85年版开始我国药典对含糖输液中5-HMF含量作了限量规定。

参麦注射液是古方“生脉散”的衍变方，由红参和麦冬两种中药材经现代工艺提取加工而成，用于治疗气阴两虚型之休克、冠心病、病毒性心肌炎、慢性肺心病、粒细胞减少症，为国家中药保护品种，系基本急救药品。参麦注射液已有20余年的临床应用，但对其中的活性成分，尤其是可能引发毒副反应的化学成分一直不是很清楚。

参麦注射液里因含有大量的果糖和蔗糖，在进行制剂时不可避免产生5-羟甲基糠醛。同时，参麦注射液产品说明书要求使用250ml葡萄糖注射液稀释使用，两者配伍使用很可能对用药患者产生一定的不良作用。

目前，参麦注射液的质量标准尚未有制定5-羟甲基糠醛的含量限定项，也未见有关于参麦注射液中5-羟甲基糠醛的定性和定量分析的报导，因此申请人认为，目前迫切需要发明一种简便快捷的，并且可以定量的检测参麦注射液生产过程中和产品质量检验时对5-羟甲基糠醛的含量测定方法，用以检测并控制5-羟甲基糠醛的含量，提高药物的质量标准，减少药物对人体的不良作用，增加药物的安全性。

发明内容

本发明的目的是寻找一种可以应用于参麦注射液生产和产品质量控制的过程中检测5-羟甲基糠醛及定量的方法，用以检测并控制5-羟甲基糠醛的含量，减少药物对人体的不良作用。本发明利用高效液相色谱法建立了一种简便快捷可靠的参麦注射液中的5-羟甲基糠醛的检测和定量的方法。

该法不仅可以用于参麦注射液成品中5-羟基糠醛的含量测定，在参麦注射液的生产环节中也可作为生产过程检测的一部分使用。

本发明的实现系通过以下步骤：

本发明中的液相色谱测定采用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂的色谱柱；以甲醇-水为流动相，其中甲醇的比例为5～15％，流动相的速度可为0.2～2.0ml/min；紫外检测波长为285±5nm；柱温为30±5℃。

本发明用于定量检测参麦注射液中的5-羟甲基糠醛的HPLC方法经方法学考察，表明该方法在大范围的进样量内与峰面积呈良好的线性关系，精密度良好，相对标准偏差(RSD)为0.1％，重现性良好，相对标准偏差(RSD)为0.2％。

附图说明

5-羟甲基糠醛对照品(上)和参麦注射液(下)的HPLC图谱

具体实施方式

1、仪器与试药

Waters alliance 2695高效液相色谱仪；

Waters 2489双波长紫外检测器；

Sartorius MC21S型电子分析天平；

甲醇(Merck，色谱纯)；

水(蒸馏水)。

参麦注射液由正大青春宝药业有限公司提供；

5-羟甲基糠醛(批号081216)对照品由上海融禾医药科技发展有限公司提供，含量为99.45％。

2、方法与结果

2.1色谱条件

色谱柱：Alltima C18(4.6×150mm，5μm)；流动相：甲醇-水溶液(8∶92)；检测波长：284nm；流速：1ml/min；柱温：30±5℃。

2.2方法学考察

2.2.1空白对照与阴性对照试验

取蒸馏水进行空白测定，按样品溶液的制备方法制备阴性样品溶液，相同条件下进行考察，高效液相色谱图中5-羟甲基糠醛特征峰相应位置无干扰峰的存在。

2.2.25-羟甲基糠醛对照品溶液的制备

精密称取5-羟甲基糠醛对照品3.086mg置于100ml容量瓶中，加蒸馏水溶解定容至刻度，摇匀即得。

2.2.3供试品溶液的制备