[发明专利]一种肝炎基因Ly6c1及其用途

说明书

技术领域

本发明涉及一种与重症肝炎早期诊断相关的基因Lymphocyte antigen 6 complex，locusC1(Ly6c1)及其编码的蛋白。

背景技术

我国属乙型肝炎病毒(HBV)感染高流行国家，一般人群的乙肝表面抗原(HBsAg)阳性率为9.09％，全国现有乙型肝炎患者约3000万人。美国的国家卫生研究所(NIH)估计在全世界有4亿人是HBV的慢性感染者。每年大约有500000人死于由HBV的长期感染引起的慢性肝炎和肝癌，另外有40000人死于重症乙型肝炎。

重症肝炎是机体在多种致病因子作用下，肝组织在短期内出现大块或亚大块坏死，导致肝功能衰竭的综合征。当前国外的重症肝炎病因以药物、酒精等中毒所致的急性肝衰竭为主，而我国的重症肝炎多由肝炎病毒，尤其是乙型肝炎病毒所致(约占70％)。由HBV引起的重症肝炎仍是中国今后近百年甚至更长时间的常见病。该疾病病情笃重，发展迅猛，发病机理不甚明了，目前临床上缺乏特异、有效的治疗靶点和干预手段，除非实施紧急肝移植(国外以肝移植为主要治疗手段，肝移植后1年存活率约为50％～60％)，绝大部分患者预后不良，并发症多，死亡率高达70-90％。因而严重威胁人民群众的生命健康，极大地增加患者家庭和社会的经济负担，影响社会稳定。

重症肝炎疗效差的主要原因之一是该病具有突发性和不可预见性的特点，患者送达医院抢救时往往已经失去最佳的治疗时间，因此若能将诊断时间提前，在早期阶段或者更早一些时候，仅仅出现重症肝炎病变趋势时即给予积极处理，则有可能通过临床干预防治疾病的发生和进展，可大大提高治愈率。而且，重症肝炎病程不同阶段的临床表现不同，治疗的侧重点也不尽相同：早期治疗效果好，晚期则只能对症治疗，效果差；由于病程地准确分辨有利于临床医师采取合适的治疗手段，因此，早期诊断在重症肝炎防治中具有特别重要的意义。

筛选重症肝炎发病早期即出现的特征性变化的基因，有利于建立重症肝炎早期诊断技术，可为重症肝炎早期治疗提供理论依据，最终能从根本上降低我国乙型重症肝炎的发病率和死亡率。

高通量基因芯片日益被用作一种分析全基因组转录动态的工具。这种应用提高了以类似的方法来确认早期重症肝炎基因的特异性变化的可能性。这种基因的特异性变化可以作为诊断的标准。

发明内容

本发明要解决的技术问题是提供一种肝炎基因Ly6c1编码的蛋白质，其具有SEQ IDNO：2所示的氨基酸序列。

本发明还同时提供了编码上述蛋白质的基因，该基因具有SEQ ID NO：1所示的核苷酸序列。

本发明还同时提供了上述基因的用途，用于制备能早期诊断重症肝炎的基因芯片。

本发明提供一种与重症肝炎早期诊断相关的新基因，并分析该基因在小鼠模型体内的表达情况，从而探索其在重症肝炎发病时的作用，进而开发早期诊断重症肝炎的诊断试剂。本发明探明了该基因在ConA诱导的重症肝炎模型中表达水平的变化。本发明的基因可作为重症肝炎的早期诊断的候选靶基因，为相关的诊断试剂盒的开发及研制提供可能。该基因与重症肝炎的病发和病变有关，为早期诊断提供了良好的靶基因。本发明的基因用于制备能早期诊断重症肝炎的基因芯片。

附图说明

下面结合附图对本发明的具体实施方式作进一步详细说明。

图1Ly6c1cDNA及相应蛋白序列图；

图2ConA诱导的重症肝炎中Ly6c1基因表达水平的变化图。

具体实施方式

实施例1、肝炎基因Ly6c1cDNA的序列分析：

Ly6c1cDNA基因共有862个碱基，如SEQ ID NO：1所示。超始密码子ATG后第一个碱基为G。Ly6c1cDNA包含了一个完整的开放读写框(60-455)，相应的蛋白质由131个氨基酸残基组成。

实施例2、新基因开放阅读框架的PCR扩增，结果测序：

1、总RNA的提取

取正常Balb/C小鼠肝脏组织100mg，液氮冷冻后，在研钵内磨成粉末，加1ml Trizol溶液(购自Invitrogen，Carlsbad，CA)中，充分混匀后加150μl氯仿，剧烈震荡，12000g离心15分钟，小心吸取透明上清液，加1ml无水乙醇室温沉淀30分钟，12000g离心25分钟，弃上清，沉淀用75％乙醇洗涤，7500g离心5分钟，弃上清，沉淀用DEPC水溶解。

2、cDNA第一链合成