[发明专利]同时测定蜂王浆中杀虫脒及其代谢产物4-氯邻甲苯胺残留量的检测方法

说明书

技术领域

本发明涉及同时测定蜂王浆中杀虫脒及其代谢产物4-氯邻甲苯胺残留量的 检测方法，尤其涉及气相色谱-质谱法测定蜂王浆中杀虫脒及其代谢产物4-氯邻 甲苯胺残留量的检测方法。

背景技术

杀虫脒属甲脒类杀虫、杀螨剂，由于对人体具有潜在的致癌危险性，把它 列为高毒杀虫剂。世界上多数国家和地区对食品中杀虫脒规定了严格的最大残 留限量。欧盟、日本由于还没有规定蜂皇浆中杀虫脒的最高残留限量，因此以一 律标准(0.01mg/kg)作为其最高残留限量。联合国法典委员会(CAC)规定： 杀虫脒的残留量应为和其代谢产物的总和。

文献报道的测定食品中杀虫脒残留量的方法，大多只是测定杀虫脒母体， 采用的是气相色谱-ECD、气相色谱-NPD和气相色谱-质谱方法。气相色谱-ECD， 需要衍生化，操作复杂。测定杀虫脒及其代谢产物的方法，是将杀虫脒在酸性 条件下加热回流，将杀虫脒转化成其代谢产物4-氯邻甲苯胺，用气相色谱-质谱 测定4-氯邻甲苯胺。需要加热回流，操作耗时复杂。

另外，中华人民共和国进出口商品检验行业标准SN/T 0213.1-93出口蜂蜜 中杀虫脒残留量检验方法气相色谱法和SN/T 0213.4-93出口蜂蜜中杀虫脒残留 量检验方法色谱/质谱法也分别公开了蜂蜜中杀虫脒残留量检验方法。上述的标 准为检测蜂蜜中杀虫脒残留量。涉及到蜂王浆中四环素类药物残留的检测方法 就很少，中国发明专利申请(申请号：200810195887.9)公开了蜂产品中多类 农兽药残留同时检测的方法，样品加入提取液三氯乙酸或高氯酸和提取液醋酸 盐、磷酸盐或硼酸盐溶液，控制PH值4.5-9.0；离心，滤液入固相萃取柱中萃 取，洗脱并吹干萃取柱，用草酸-甲醇溶液洗柱，洗脱液用甲醇水溶液定容，入 液相色谱-串联质谱分析测试，所得的色谱峰与各已知药物的标准色谱峰对照， 根据保留时间和质谱离子的丰度确定所检出药物的具体名称。该方法只需对品 样进行一次前处理，即可同时提取磺胺类、喹诺酮类、大环内酯类、林可胺类、 硝基咪唑类、B-内酰胺类、四环素类、氯霉素类、磺胺增效剂类、杀虫脒，三 唑醇等11大类60多种兽药的药物残留，分析效率高，检测成本大降低。

现有的各方法中一般只测定杀虫脒，但是对于杀虫脒的动物代谢产物4-氯 邻甲苯胺灭有测定，这显然是不完全的。或者，现有的方法是采用将杀虫脒转 化成4-氯邻甲苯胺，测定4-氯邻甲苯胺，但是这种转化是耗时、复杂的，在现 有的文献中还未有采用气相色谱-质谱法同时测定杀虫脒及其代谢产物4-氯邻甲 苯胺残留量的检测方法。

发明内容

为了解决现有蜂王浆中杀虫脒及其代谢产物4-氯邻甲苯胺残留量无法同时 检测的难题，本发明的目的是提供一种气相色谱-质谱法同时测定蜂王浆中杀虫 脒及其代谢产物4-氯邻甲苯胺残留量的检测方法，该方法不需要经过转化，同 时测定杀虫脒及其代谢产物4-氯邻甲苯胺残留量，具有准确、灵敏、简便的特 点。

为了实现上述的目的，本发明采用了以下的技术方案：

同时测定蜂王浆中杀虫脒及其代谢产物4-氯邻甲苯胺残留量的检测方法， 该方法包括以下的步骤：①提取：称取试样于离心管中，加三氯乙酸溶液涡旋 混匀，离心；将上层水相转移到另一离心管中，加氢氧化钠调pH大于12；加 入氯化钠和正己烷-丙酮混合溶剂，涡旋混匀，将上层有机相转移入浓缩瓶中； 水相中再加入正己烷-丙酮或正己烷-乙醚的混合溶剂，重复提取一次，合并上层 有机相，水浴减压浓缩至近干；②净化：浓缩瓶中残留物用乙腈溶解洗涤，转 移到离心管中，加入正己烷，涡旋混匀，离心，将上层正己烷相转移到另一离 心管中，乙腈相再加入正己烷，重复操作一次，合并正己烷相；加入乙腈，涡 旋混匀，离心，弃去上层正己烷相；合并乙腈相，水浴减压浓缩至近干，用丙 酮溶解并定容；③气相色谱-质谱测定，选择离子监测方式，每种化合物分别选 择一个定量离子，2～3个定性离子，外标法定量。

作为优选，上述的步骤①三氯乙酸溶液的浓度为5％体积百分，使用量为4～ 6mL/g试样；氢氧化钠的浓度为2mol/L；正己烷-丙酮混合溶剂中正己烷和丙酮 的体积混合比为1∶1。

作为优选，上述的步骤③中选用Agilent7890A-5975C气相色谱-质谱仪，配 电子轰击源；色谱柱选用DB-5ms石英毛细管柱，30m×0.25mm(id)×0.25μm。 气相色谱-质谱的条件如下：

色谱柱温度：