[发明专利]一种羽芒菊总黄酮的制备方法及其用途

说明书

技术领域

本发明属于黄酮提取制备方法技术领域，具体为一种羽芒菊总黄酮的制备方法及其用途。

背景技术

黄酮类化合物是一类广泛存在于植物界的重要的生物活性物质，往往具有抗氧化、抗衰老、抗肿瘤等作用，具有很好的开发应用价值。

羽芒菊(Tridaxprocumbens.L)为菊科长柄菊属多年生草本植物。原产于美洲热带地区，后传播于印度、中南半岛及印度尼西亚等国。我国引入海南、广东及台湾等地。甘微，苦寒。羽芒菊全草具有抗氧化、抗肿瘤、抗菌消炎等方面的作用。关于羽芒菊总黄酮的制备方法及其用途，经文献检索，尚未见研究报道。

近年来从中草药中提取总黄酮的方法多采用水提或有机溶剂提取(包括渗漉提取或回流提取)、有机溶剂萃取、再结合大孔树脂分离富集的方法。其中提取用溶剂多采用一定比例的含水乙醇，再通过乙酸乙酯或正丁醇萃取。采用这些方法往往存在溶剂用量大、提取时间长、操作麻烦、工作效率较低等缺点，分离富集黄酮类成分多采用大孔树脂柱色谱，选用不同性能规格的树脂填料，以不同比例的含水有机溶剂进行梯度洗脱的方法。采用这些方法同样存在操作步骤及洗脱步骤较多，有机溶剂用量大，收率底，生产成本较高的缺点，尤其是提取纯化过程中的加热浓缩环节较多，容易造成有效成分破坏或流失，总黄酮的提取率及转移率不高，且常要用到氯仿、乙酸乙酯、正丁醇、甲醇等有害溶剂，对环境造成污染，同时黄酮提取物中常含有一些重金属杂质，且往往超标。

发明内容

针对现有技术中存在的上述问题，本发明的目的在于设计提供一种羽芒菊总黄酮的制备方法的技术方案，其工艺简单、操作方便、设备投资少、溶剂用量小，无环境污染，生产成本低，提取物收率高。

所述的一种羽芒菊总黄酮的制备方法，其特征在于包括以下步骤：

1)原料处理：将羽芒菊全草粉碎成粗粉，过20～60目筛；

2)提取：将羽芒菊粗粉放入提取容器中，并将其置入超声波提取器中，在40～60℃的条件下每次用6～10倍量50％～70％的含水乙醇做溶剂超声提取2-3次，每次30～60min，抽滤，合并滤液；

3)减压浓缩：将步骤2)的滤液在水浴温度50℃以下真空薄膜浓缩，回收乙醇，得到浓缩液；

4)脱色及脱脂处理：将步骤3)的浓缩液用粉末状活性炭在50℃以下超声30～50min，抽滤，除去活性炭，滤液备用；

5)减压浓缩：步骤4)的滤液继续在50℃以下，真空度为0.095Mpa的条件下真空薄膜浓缩，得到浓缩液；

6)大孔树脂纯化：将步骤5)的浓缩液通过大孔吸附树脂分离富集，先用H₂O洗脱，再依次用10～70％的含水乙醇进行梯度洗脱，最后用70％丙酮洗脱，洗脱流速为5～15mL·min^-1，分别收集4倍柱体积的各部位洗脱液，合并25～60％含水乙醇各部位的洗脱液，将合并的洗脱液在50℃以下真空浓缩、干燥，即得羽芒菊总黄酮提取物干粉。

所述的一种羽芒菊总黄酮的制备方法，其特征在于步骤2)中：超声提取的温度为45～55℃，优选50～55℃；超声提取时间45～55min，优选50～55min；含水乙醇的用量为羽芒菊粗粉重量的8～10倍，含水乙醇的浓度为55％～65％，优选60％～65％。

所述的一种羽芒菊总黄酮的制备方法，其特征在于步骤4)中：超声脱色及脱脂处理的时间为35～45min，优选40～45min。

所述的一种羽芒菊总黄酮的制备方法，其特征在于步骤4)中：粉末状活性炭的用量为羽芒菊粗粉重量的1-3％，优选2-3％。

所述的一种羽芒菊总黄酮的制备方法，其特征在于步骤6)中：依次用10％含水乙醇、25％、40％、60％、70％的含水乙醇进行梯度洗脱。

所述的一种羽芒菊总黄酮的制备方法，其特征在于步骤6)中：洗脱流速为6～12mL·min^-1，优选8～10mL·min^-1。

所述的一种羽芒菊总黄酮的制备方法，其特征在于步骤6)中：所述的大孔吸附树脂为DiaionHP-20大孔吸附树脂，色谱柱的径高比为1∶10～15，优选1∶12～13。

所述方法制得的羽芒菊总黄酮，其特征在于其所具有的在制备抗氧化及抗肿瘤药物中的应用。