[发明专利]丫蕊花组培及种植方法

权利要求书

1.丫蕊花组培及种植方法，包括取丫蕊花外植体，消毒清洗，在MS培养基加6-BA 0.25-0.5mg/L，NAA 0.2-0.3mg/L中进行愈伤组织诱导与分化，在MS培养基加6-BA 0.5mg/L，NAA 0.3-0.4mg/L中进行不定芽增殖，在1/2MS+IBA 0.2mg/L培养基中进行不定根诱导，炼苗，无公害种植即在天然条件下进行种植步骤。

2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：所述组培是用叶组织离体培养育苗，剪下叶片，消毒后接种在MS培养基加6-BA0.25-0.5mg/L，NAA 0.2-0.3mg/L中培养30天，形成愈伤组织并分化为丛芽，培养的不定芽单个切开转接在MS培养基加6-BA0.5mg/L，NAA 0.3-0.4mg/L中进行增殖培养，形成增殖体的幼苗，转接到1/2MS+IBA 0.2mg/L的培养基中，15-21天生根，炼苗后移栽。

3.如权利要求1所述的方法，其特征是丫蕊花外植体选用叶片，经水洗，70％的乙醇和升汞消毒，无菌水洗净后，剪成小块，进行愈伤组织诱导与分化。

4.如权利要求1所述的方法，其特征在于愈伤组织诱导与分化是在无菌条件下，从丫蕊花消毒后叶片上剪下1平方厘米小叶块，接种在MS培养基加含6-BA 0.25-0.5mg/L，NAA 0.2-0.3mg/L培养基上，在20-25℃，光照1000Lx，光照10-12小时，湿度大于70％条件下直接诱导产生丛芽，30-40天开始萌动；再经8-14天有丛芽出现；7-15天丛芽长叶。

5.如权利要求1所述的方法，其特征在于不定芽增殖是将愈伤组织诱导与分化出的丛芽单个切开，在MS培养基加含6-BA 0.5mg/L，NAA 0.3-0.4mg/L培养基上进行增殖培养；40-60天形成幼苗；增殖培养产生的新丛芽，叶变绿，2-3cm时，进一步转接进行增殖培养或继代培养。

6.如权利要求1所述的方法，其特征在于不定根诱导是取出增殖培养长出的高4-5cm的幼苗，单个切开，转接到1/2MS+IBA 0.2mg/L培养基中，转接后15-21天，开始生根；待40-60天根达3条以上，叶达6-10片，高达6-8cm的试管苗取出炼苗。

7.如权利要求1或6所述的方法，其特征在于炼苗是将试管苗从组培室取出后置于温棚中，放置5-7天，取出幼苗洗净培养基后移植在装有腐质土和红土1∶1并加少许腐质叶为基质的营养袋内，浇水，在1000-2000Lx中光照8-12小时，湿度大于70％条件下炼苗1个月，当叶达6-10片，高达6-8cm时移栽种植。

8.如权利要求1所述的方法，其特征在于无公害种植是在天然条件下进行种植，选择海拔800～2，500m；林下，沟边，瀑布两旁或有遮阴条件的荒土；满足日照年平均6小时/日，年平均最高温度18℃，月平均最高温度11～23℃及最低温0℃的条件；满足地下5cm土温年平均最高温度16℃，月平均最高温度9～20℃及最低9℃的条件；满足湿度最高达90％，最低70％，月平均湿度在70～90％之间的条件；建立隔离区，防牛马进入而踏坏。