[发明专利]从木霉复合酶中分离浓缩果胶酶和纤维素酶的方法

权利要求书

1.一种从木霉复合酶中分离浓缩果胶酶和纤维素酶的方法，其特征在于，包括：向木霉发酵制成的发酵粗酶液中加入含三价铁离子的盐，使果胶酶和纤维素酶分离，相对于发酵粗酶液总体积，所述含三价铁离子的盐的加入量为使其终浓度为10-100mM。

2.根据权利要求1所述的从木霉复合酶中分离浓缩果胶酶和纤维素酶的方法，其中，相对于发酵粗酶液总体积，所述含三价铁离子的盐的加入量为使其终浓度为10-30mM。

3.根据权利要求1或2所述的从木霉复合酶中分离浓缩果胶酶和纤维素酶的方法，其中，所述含三价铁离子的盐为选自以下组成的组中的一种或多种：硫酸铁，三氯化铁，硝酸铁，磷酸铁、碳酸铁。

4.根据权利要求3所述的从木霉复合酶中分离浓缩果胶酶和纤维素酶的方法，其中，所述含三价铁离子的盐为三氯化铁。

5.根据权利要求1或2所述的从木霉复合酶中分离浓缩果胶酶和纤维素酶的方法，其中，在加入含三价铁离子的盐之前，进一步包括对所述发酵粗酶液的预处理工序，即：调节发酵粗酶液的pH为4.0-7.0，基于该发酵粗酶液的总重量，加入0.05-2.0重量％的钙盐后，固液分离，将得到的上清液作为要进行下一步加工的发酵粗酶液。

6.根据权利要求3所述的从木霉复合酶中分离浓缩果胶酶和纤维素酶的方法，其中，在加入含三价铁离子的盐之前，进一步包括对所述发酵粗酶液的预处理工序，即：调节发酵粗酶液的pH为4.0-7.0，基于该发酵粗酶液的总重量，加入0.05-2.0重量％的钙盐后，固液分离，将得到的上清液作为要进行下一步加工的发酵粗酶液。

7.根据权利要求4所述的从木霉复合酶中分离浓缩果胶酶和纤维素酶的方法，其中，在加入含三价铁离子的盐之前，进一步包括对所述发酵粗酶液的预处理工序，即：调节发酵粗酶液的pH为4.0-7.0，基于该发酵粗酶液的总重量，加入0.05-2.0重量％的钙盐后，固液分离，将得到的上清液作为要进行下一步加工的发酵粗酶液。

8.根据权利要求1或2所述的从木霉复合酶中分离浓缩果胶酶和纤维素酶的方法，其中，在使果胶酶和纤维素酶分离之后，进一步包括重悬果胶酶的工序，即：向分离后的含果胶酶的固相中加入重悬液，使该固相再溶解得到浓缩果胶酶液。

9.根据权利要求8所述的从木霉复合酶中分离浓缩果胶酶和纤维素酶的方法，其中，所述重悬液含有使铁离子络合的络合剂。

10.根据权利要求8所述的从木霉复合酶中分离浓缩果胶酶和纤维素酶的方法，其中，所述重悬液的体积是发酵粗酶总液体积的5-50％。

11.根据权利要求3所述的从木霉复合酶中分离浓缩果胶酶和纤维素酶的方法，其中，在使果胶酶和纤维素酶分离之后，进一步包括重悬果胶酶的工序，即：向分离后的含果胶酶的固相中加入重悬液，使该固相再溶解得到浓缩果胶酶液。

12.根据权利要求4所述的从木霉复合酶中分离浓缩果胶酶和纤维素酶的方法，其中，在使果胶酶和纤维素酶分离之后，进一步包括重悬果胶酶的工序，即：向分离后的含果胶酶的固相中加入重悬液，使该固相再溶解得到浓缩果胶酶液。

13.根据权利要求5所述的从木霉复合酶中分离浓缩果胶酶和纤维素酶的方法，其中，在使果胶酶和纤维素酶分离之后，进一步包括重悬果胶酶的工序，即：向分离后的含果胶酶的固相中加入重悬液，使该固相再溶解得到浓缩果胶酶液。

14.根据权利要求1或2所述的从木霉复合酶中分离浓缩果胶酶和纤维素酶的方法，其中，在使果胶酶和纤维素酶分离之后，进一步包括提纯纤维素酶的工序，即，将使果胶酶和纤维素酶分离所得到的液相，加入锌盐进行沉淀，收集沉淀物，任选地向沉淀物中加入重悬液，使该沉淀物再溶解得到浓缩纤维素酶液。

15.根据权利要求14所述的从木霉复合酶中分离浓缩果胶酶和纤维素酶的方法，其中，所述重悬液含有使锌盐络合的络合剂。

16.根据权利要求14所述的从木霉复合酶中分离浓缩果胶酶和纤维素酶的方法，其中，所述重悬液的体积是发酵粗酶总液体积的3-50％。