[发明专利]一种毒品吗啡的表面等离子体共振检测方法

说明书

技术领域

本发明属于检测技术领域，涉及一种毒品吗啡的表面等离子体共振快速检测方法。

背景技术

吗啡(Morphine，MO)是从鸦片中提取的一种异喹啉生物碱，是鸦片中最主要、含量最多的有效成分，平均含量为10％。吗啡因其具有强烈的镇痛作用，被广泛用于临床治疗。但是，吗啡的极易成瘾性使得长期吸食者无论从身体上还是心理上都会对吗啡产生严重的依赖性，造成严重的毒物癖。吗啡再配上多种化学药剂，经过进一步加工，即成为毒性更大的海洛因。吗啡毒品的滥用，给人们的生活和生命财产带来了极大的危害。因此，无论在法庭科学工作中还是在医疗监测过程中，实现对吗啡及其代谢物的微量、灵敏、准确、快速、自动化的检测具有极其重要的意义。

目前，药物检测领域针对毒品吗啡的检测方法较多，几乎涉及了现代分析化学的所有技术。多年来，由于色谱法具有分离效率高、分析速度快、选择性好以及多组分同时分析等优点，特别是它与质谱法联用(GC/MS)一直承担着人们对药物吗啡的常规检测任务。然而，它需要复杂的样品前处理过程、昂贵的仪器设备、熟练的技术人员，此外完成一次分析费时且费用高，已难以满足目前药物监测中大量样品的快速以及现场检测的需要，这就要求有更新颖的快速检测技术出现。

表面等离子体波共振(Surface Plasmon Resonance，SPR)是一种物理光学现象，它通过测量金属表面物质折射率的变化来研究物质的化学和物理吸附性质。近十几年来基于SPR原理的传感器及其应用研究获得了长足的发展。与常规检测技术相比，其具有高灵敏度、响应快、体积小、机械强度大、检测过程快捷、能够获得实时数据、操作方便、无须标记、可保持分子的生物活性、抗电磁干扰能力强和光纤相连可实现数据的远程采集和连续在线监控等突出优点。目前，国内外将SPR传感技术用于毒品吗啡检测的研究报道还很少，仅有的数篇报道，主要是基于传统的SPR免疫传感技术，通过竞争法实现对吗啡分子的检测。例如，日本的Go Sakai等人研究成功了利用表面等离子体共振生物传感器通过溶液竞争法对尿液中吗啡的检测。

免疫分析方面的研究是SPR传感技术应用时间最早、应用范围最广、发展最为完善的领域之一，然而由于技术具有需要动物实验、对检测环境要求苛刻、造价昂贵以及芯片重复使用性能较差等难以克服的缺点，因此限制了SPR传感技术在吗啡检测中的的发展。

我们在专利申请号为200910119164.5的发明专利中报道的一种光学传感器的毒品吗啡分子识别敏感芯片的基础上，结合表面等离子体共振检测仪，提供一种毒品吗啡的表面等离子体共振检测方法。

发明内容

本发明的目的是为了解决现有的SPR技术在检测毒品吗啡时存在对检测环境要求苛刻、造价昂贵、选择性较差等问题，提供一种毒品吗啡的表面等离子体共振快速检测方法，可以应用于有机溶剂中大批量样品毒品吗啡的直接检测。

本发明的目的是通过下述技术方案实现的。

本发明将一种光学传感器的毒品吗啡分子识别敏感芯片作为表面等离子体共振检测仪的传感芯片，当待测样品通过传感芯片表面时，利用表面等离子体共振检测仪检测待测样品与分子识别敏感芯片界面处全反射光的光强变化来直接测定待测样品中的吗啡含量。具体操作步骤如下：

(1)将光学传感器的毒品吗啡分子识别敏感芯片固定在表面等离子体共振检测仪中作为传感芯片；

(2)将有机溶剂流过感芯片表面，待反射光强达到稳定不变时，对反射光强按角度进行扫描，记录下SPR光谱图；

(3)取不同浓度的吗啡标准溶液，按照由低浓度到高浓度的顺序，分别流过表面等离子体共振传感芯片的表面；

每次流入一定浓度的吗啡标准液，与传感芯片反应1～5min，然后流过有机溶剂，待反射光强达到稳定不变时，对反射光强按角度进行扫描，记录下此浓度的吗啡标准液与传感芯片发生吸附反应后的SPR光谱图，至此完成一个浓度的吗啡标准液的检测；

依此类推，直到得到各个浓度的吗啡标准溶液与传感芯片反应后的SPR光谱图。

(4)分别将(3)中得到的不同浓度的吗啡标准溶液与传感芯片反应后的SPR光谱图与(2)中的SPR光谱图进行比较，计算各浓度下吸附反应前后引起的SPR共振角的位移值Δθ；

(5)以SPR共振角的位移值Δθ为纵坐标，以加入的吗啡标准溶液浓度值的负对数做为横坐标绘制标准曲线；

(6)按标准曲线的测试方法检测待测样品，根据其与传感芯片发生吸附反应前后引起SPR共振角的位移值Δθ，在标准曲线上读出吗啡的含量；