[发明专利]叠氮胸苷治疗白血病的新用途

说明书

发明领域

本发明涉及一种叠氮胸苷的新用途，本发明特点涉及一种叠氮胸苷治疗白血病的新用途。

背景技术

白血病是造血组织的恶性疾病，又称“血癌”。其特点是骨髓及其他造血组织中有大量白血病细胞无限制地增生，并进入外周血液，而正常血细胞的制造被明显抑制。白血病是造血系统的恶性肿瘤，是我国最常见的恶性肿瘤之一。根据回顾调查，各地区白血病的发病率在各种肿瘤中占第六位，该病居年轻人恶性疾病中的首位。

叠氮胸苷(AZT)是一种核苷类逆转录酶抑制剂，在世界范围内已被广泛使用治疗艾滋病，它能有效清除艾滋病患者体内的病毒。但叠氮胸苷(AZT)用于治疗白血病的报道还不曾见到。

发明内容

本发明的目的在于公开叠氮胸苷用于治疗白血病的新用途。

药效实验表明，叠氮胸苷具有抑制人白血病细胞Jukat及鼠白血病细胞L615生长的作用；可以抑制小鼠L615白血病模型外周血、骨髓及肝脾组织的侵润，显著延长白血病小鼠的生存期；有效减低小鼠Friend病毒感染后脾脏中病毒载量，对治疗Friend鼠白血病病毒诱发的急性红白血病有显著作用。

附图说明：

图1：AZT对白血病细胞增值的影响；

图2：模型组的外周血涂片，瑞氏染色×1000；

图3：AZT组的外周血涂片，瑞氏染色×1000

图4：模型组的骨髓涂片，瑞氏染色×1000

图5：AZT组的骨髓涂片，瑞氏染色×1000

图6：模型组的肝组织切片，HE染色×1000

图7：AZT组的肝组织切片，HE染色×1000

图8：模型组的脾组织切片，HE染色×1000

图9：AZT组的脾组织切片，HE染色×1000

图10：MuLV感染28天后脾脏病毒mRNA表达凝胶电泳图；

本发明目的是通过如下实验例实现的：

实验例1叠氮胸苷抑制白血病细胞增值实验

1、实验材料

(1)药品与试剂

叠氮胸苷(AZT)；RPMI1640购于GIBICO；胎牛血清：杭州四季青生物工程材料有限公司产品；二甲基亚砜(DMSO)：北京化学试剂公司；MTT购于SIGMA.。

(2)肿瘤细胞株

鼠白血病细胞L615及人白血病细胞Jukat。

(3)主要仪器

倒置显微镜：日本OLYMPAS公司产品。酶标仪：美国BIO-RAD公司550型。

2、MTT比色法检测细胞增殖抑制率

将处于对数生长期细胞配制成浓度为1～2×104个/ml的细胞悬液，按1000～2000个细胞/孔接种于96孔板，每孔加100μl。次日加含不同浓度化合物及相应溶剂对照的新鲜培养基，每孔加100μl(DMSO终浓度＜0.1％)，受试化合物设5～10个剂量组，以10mg/ml为最大终浓度依次向下5倍稀释(阳性药以5mg/ml为最大终浓度依次向下2倍稀释)，每组设5个平行孔，于37℃继续培养48h后，每孔加无血清培养基新鲜配制的0.5mg/ml MTT100μl，继续培养4h，然后，每孔加200μl DMSO溶解甲臜颗粒，用微型振荡器振荡混匀后，于酶标仪上测定光密度值(OD)(参考波长655nm，检测波长570nm)，以溶剂对照处理肿瘤细胞为对照组，数据处理以T/C表示，T/C％＝100×OD值处理组/OD值对照组，通过回归计算，可求出T/C＝50％的药物浓度，即IC50值，并按下述公式计算化合物对肿瘤细胞的抑制率：

3、统计分析

使用EXCEL统计学软件进行分析，进行多组t检验，P＜0.05时，具有统计学意义。

4、结果

结果如附图1所示，不同浓度AZT对人白血病细胞Jukat及鼠白血病细胞L615的生长抑制作用呈剂量依赖性，实验组与对照组进行比较，差异具有显著性(P＜0.01)。通过直线回归计算，IC50值为2.924mg/ml、0.028mg/ml。由此说明AZT可以明显抑制白血病细胞的生长。

实验例2叠氮胸苷对小鼠L615白血病细胞生长的抑制实验

1、实验材料

(1)药品及试剂：克度(AZT，齐多夫定片)，东北制药总厂产品，购自中国医药保健品进出口总公司；环磷酰胺(CTX，上海华联制药有限公司生产；RPMI1640培养基(Gibco公司)，胎牛血清(杭州四季青)，瑞氏染液。

(2)实验仪器及器械：CO₂培养箱，倒置显微镜，光学显微镜，celltacMEK-6318K血细胞分析仪。