[发明专利]ITGB4BP及其衍生物用于预防和/或治疗增生性瘢痕及纤维化病变

说明书

技术领域

本发明涉及已知物质的新药用用途。具体地，本发明涉及β4整合素 结合蛋白(Integrin beta 4binding protein，ITGB4BP)及其衍生物，表达 ITGB4BP及其衍生物的基因重组表达载体，在预防和/或治疗增生性瘢痕 及纤维化病变中的新应用。

背景技术

纤维化疾病是由于细胞外基质(extracellular matrix，ECM)如胶原等 过度沉积而导致组织增生、变硬及瘢痕形成的的一类病变。持续的感染、 自身免疫性疾病、过敏反应、化学损伤、辐射和组织损伤等慢性炎症长期 刺激导致成纤维细胞向肌成纤维细胞分化，造成大量结缔组织沉积形成纤 维化，从而导致器官功能丧失直至死亡(1-3)。增生性瘢痕是纤维化疾病 的一种，是由于深部真皮受到热力或者其它形式创伤后，纤维增生紊乱导 致，常常引起患者美观和功能上的严重损害(4)。在进行增生性瘢痕成纤 维细胞分化的机制研究中我们发现P311基因(GenBank ID：hsu36189)与其 有着密切的联系(5)，但其具体机制如何，文献却鲜有报道。

P311(又名PTZ17，pentylenetetrazol 17)的编码基因由Matthieu等于1993 年首先在胚胎大鼠的脑组织中发现(6)。P311基因定位于5号染色体 ORF13，其完整的基因全长约为2025bp，包含3个开放阅读框，但仅第一 个阅读框编码含68个氨基酸的蛋白P311，分子量大小为8KD，该阅读框在 人和小鼠之间高度保守。此外，在人、小鼠和鸡P311的N末端还存在一个 高度保守的PEST结构域(富含Pro，Glu，Ser和Thr的区域)(7)。P311广泛 表达于多种组织，其中在脑组织尤其是胚胎发育后期的大脑组织与成年期 的小脑、海马和嗅球中高表达，同时也表达于肝、脾、肾、眼、心等器官 与骨髓间充质、成纤维细胞、肌成纤维细胞等组织细胞(6)，而且Pan与 Fujitani、Taylor等还分别证实该蛋白能表达于肌成纤维细胞、神经细胞的 胞浆与胞核中。P311是机体的一种具有重要生物学作用的细胞因子，参与 体内细胞分化、调节其它蛋白/基因转录、创伤修复、肿瘤发生等多种正常 或异常的生物学活动(6-9)。

我们利用酵母双杂交技术筛选了成人肝cDNA文库(美国BD Clontech 公司)中能与P311相互作用的蛋白的编码序列，经过生物信息学分析、 回复性验证和激光共聚焦共定位检测后获得了一个目的基因，其编码的蛋 白是：β4整合素结合蛋白(Integrin beta 4binding protein，ITGB4BP，SEQ ID NO 1)(10)。研究提示该蛋白在细胞骨架形成及细胞凋亡中起着重要 的作用，并可能在增生性瘢痕成纤维细胞分化过程中发挥了重要作用。以 下就国内外该蛋白相关功能研究进行综述。

1.   ITGB4BP基本特征

1.1  ITGB4BP的编码基因：

Francesca Sanvito等于1998年通过荧光原位杂交技术发现ITGB4BP 基因(SEQ ID NO 2，NCBI genebank登记号为NM-002212)定位于20号 染色体的长臂20q11.2区，其mRNA全长1108bp，其开放读框含有735 个核苷酸(11)。ITGB4BP基因有7个外显子和6个内含子，该基因的5’ 端缺少TATA启动子结合区，CpG岛(12)。ITGB4BP基因在真核细胞中序 列保守，在哺乳动物和酵母中有72％同源性，其中有85％序列相似(13)。 ITGB4BP基因除了在人、小鼠、大鼠、非洲爪蟾等脊椎动物中发现外，在 果蝇、乌贼、软疣等非脊椎动物上也发现该基因的存在，并且该基因的结 构域在哺乳动物及非脊椎动物之间高度保守(14)。

1.2  ITGB4BP编码蛋白：