[发明专利]一种检测溶液中蛋白质含量的方法有效
| 申请号: | 200910082087.0 | 申请日: | 2009-04-22 |
| 公开(公告)号: | CN101871881A | 公开(公告)日: | 2010-10-27 |
| 发明(设计)人: | 祁志美;邓琳 | 申请(专利权)人: | 中国科学院电子学研究所 |
| 主分类号: | G01N21/31 | 分类号: | G01N21/31;G01N21/03 |
| 代理公司: | 中科专利商标代理有限责任公司 11021 | 代理人: | 周长兴 |
| 地址: | 100080 *** | 国省代码: | 北京;11 |
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| 摘要: | |||
| 搜索关键词: | 一种 检测 溶液 蛋白质 含量 方法 | ||
1.一种检测溶液中蛋白质含量的方法,包括:
调节缓冲溶液的pH值到蛋白质的等电点之下,选用在溶液中始终带正电的色素指示剂,将待测蛋白质与色素指示剂共同溶于缓冲溶液中,蛋白质分子与色素指示剂在光波导表面形成竞争吸附,连续记录吸收光谱随时间的变化,直到吸收光谱随时间不再变化,即竞争吸附达到平衡状态;
在此过程中,通过探测色素指示剂对导波光的吸收谱随时间的变化情况来检测溶液中蛋白质的含量;或
通过探测光波导输出光强度随时间的变化情况来检测溶液中蛋白质的含量;
所述缓冲溶液满足以下条件:
(1)蛋白质和色素指示剂共同溶于缓冲溶液,且蛋白质、色素指示剂和缓冲溶液三者之间互不发生反应;
(2)缓冲溶液的pH值可以在一定范围内调节,既满足蛋白质的等电点条件又保证蛋白质不失活。
2.如权利要求1所述的方法,其中,缓冲溶液是去离子水稀释的磷酸或其它性质相同或相近的水溶液。
3.如权利要求1所述的方法,其中,色素指示剂为阳离子色素。
4.如权利要求1或3所述的方法,其中,色素指示剂为亚甲基蓝、甲基兰或罗丹明6G。
5.如权利要求1所述的方法,其中,蛋白质是牛血清蛋白、血红蛋白、肌红蛋白、细胞色素蛋白、胶原蛋白、免疫球蛋白、酪蛋白、溶菌酶、病毒蛋白中的一种或几种。
6.一种实现权利要求1所述检测溶液中蛋白质含量方法的装置,主要包括:
一玻璃光波导,置于一光波导衬底上;
一样品池,置于平面玻璃光波导的上方,并与光波导接触;
样品池的两侧各设置一棱镜耦合器,棱镜耦合器与光波导接触;
于棱镜耦合器的入射光和出射光的光路上各设有聚焦透镜;
一宽带光源或单色光光源,置于入射光的聚焦透镜的光路上;
一光谱仪或光电二极管探测仪,置于出射光的聚焦透镜的光路上;
光源发出的光经过聚焦透镜聚焦后,由棱镜耦合器输入光波导中成为导波光,导波光在光波导内传播后又由棱镜耦合器输出,输出光通过聚焦透镜聚焦后又传输至光谱仪或光电二极管探测仪对光信号进行处理。
7.如权利要求6所述检测溶液中蛋白质含量的装置,其中,光波导为平面光波导或三维光波导。
8.如权利要求6所述检测溶液中蛋白质含量的装置,其中,光源发出的光由光纤传输到入射光的聚焦透镜上。
9.如权利要求6所述检测溶液中蛋白质含量的装置,其中,经过出射光聚焦透镜聚焦后的出射光由光纤传输至光谱仪或光电二极管探测仪。
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