[发明专利]一种预防和/或治疗幽门螺杆菌感染的疫苗有效
申请号: | 200910077752.7 | 申请日: | 2009-02-16 |
公开(公告)号: | CN101496898A | 公开(公告)日: | 2009-08-05 |
发明(设计)人: | 刘纯杰;王涛;陶好霞;王令春;袁盛凌;展德文;王芃;王艳春 | 申请(专利权)人: | 中国人民解放军军事医学科学院生物工程研究所 |
主分类号: | A61K39/02 | 分类号: | A61K39/02;A61P31/04 |
代理公司: | 北京纪凯知识产权代理有限公司 | 代理人: | 关 畅;任凤华 |
地址: | 100071北京市丰台*** | 国省代码: | 北京;11 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 预防 治疗 幽门 螺杆 感染 疫苗 | ||
技术领域
本发明涉及一种预防和/或治疗幽门螺杆菌感染的疫苗。
背景技术
幽门螺杆菌(Helicobacter pylori,H.pylori)是导致慢性胃炎、胃溃疡、十二指肠溃疡、胃腺癌和胃淋巴瘤的主要病原菌,被世界卫生组织国际癌症研究机构(IARC)列为I类致癌因子(Type I carcinogen)。临床上针对幽门螺杆菌使用的抗生素治疗手段有着诸多缺点,其疫苗的开发有着非常重要的意义。目前研究中应用的抗原如幽门螺杆菌全菌破碎物、尿素酶和过氧化氢酶等均不是十分理想,所以寻找新的有效的抗原成为人们关注的焦点之一。
幽门螺杆菌是通过粘附到胃粘膜上皮表面致病的,粘附素、外膜蛋白和分泌蛋白是重要的致病因子,同时也是疫苗候选抗原。幽门螺杆菌特殊的定植环境决定了粘膜免疫是较好的疫苗免疫方式,粘膜免疫不仅能够激发强烈的体液免疫,同时还能较好的诱导局部的IgA抗体水平的升高。现有的研究表明,幽门螺杆菌裂解物、尿素酶、过氧化氢酶以及热休克蛋白等许多抗原都能够通过粘膜免疫的方式显著地降低幽门螺杆菌在胃组织中的定植水平,表现出一定的保护作用(Prinz C,Nadia H,Voland P.Helicobacter pylori virulence factors and the host immune response:implications for therapeutic vaccination.Trends in Microbiology.2003.11:134-138.)。
发明内容
本发明的目的是提供一种预防和/或治疗幽门螺杆菌感染的疫苗。
本发明所提供的预防和/或治疗幽门螺杆菌感染的疫苗,其活性成分为HP0762蛋白;所述HP0762蛋白的氨基酸序列如GenBank Accession No.ACM46115.1所示。
上述疫苗中还可包括佐剂,所述佐剂具体可为霍乱毒素B亚单位。
上述疫苗中,所述HP0762蛋白和所述霍乱毒素B亚单位的质量比为(1-50)∶1,具体可为8∶1。
上述疫苗可以制成滴鼻剂、喷雾剂、口服胶囊、口服剂或皮下、皮内、肌肉注射剂。
本发明的另一个目的是提供HP0762蛋白在制备预防和/或治疗幽门螺杆菌感染的疫苗中的应用,所述HP0762蛋白的氨基酸序列如GenBank AccessionNo.ACM46115.1所示。
本发明通过反向疫苗学的方法从幽门螺杆菌基因组中筛选并表达得到新的疫苗候选抗原。首先,通过生物信息学分析方法从幽门螺杆菌26695和幽门螺杆菌J99的基因组中初步筛选得到43个候选基因,然后进一步在功能分析和文献调研的基础上主要考察功能未知或可能与幽门螺杆菌致病相关的基因,从中确定了19个候选基因进入下一阶段的抗原制备与评价;然后从幽门螺杆菌SS1的基因组中扩增了上述19个基因,以pET-28a表达系统为载体分别构建重组表达质粒,转化E.coliBL21(DE3),经过诱导,有10个重组蛋白成功表达;考察上述候选抗原是否真正存在于幽门螺杆菌外膜蛋白组分中,是否参与了对细胞的粘附,为进一步的动物实验打下基础;最后将上述成功表达并经纯化的候选抗原与粘膜佐剂CTB混合,鼻饲免疫BALB/c小鼠,口服幽门螺杆菌SS1攻毒,评价抗原的保护性。
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