[发明专利]人血清白蛋白-干扰素融合蛋白及其编码基因与应用

说明书

技术领域

本发明涉及人血清白蛋白-干扰素融合蛋白及其编码基因与应用。

背景技术

干扰素(interferon，IFN)是一类具有抗病毒、抗增殖以及免疫调节活性的 细胞因子。根据其活性和产生细胞的类型不同，干扰素可分为干扰素-α，干扰素-β 和干扰素-γ等。其中干扰素-α(如干扰素-α2a，干扰素-α2b和干扰素-α1b) 在临床上被广泛用于治疗多种病毒性疾病(乙型肝炎，丙型肝炎)和肿瘤。

然而天然干扰素-α的半衰期较短，只有频繁给药(在临床治疗中往往采用每 周注射三次的用药方式)才能获得令人满意的疗效。如此频繁的用药方式再加上较 长的治疗周期(6-12个月)使得病人较难承受。因此迫切需要研制出作用时间长的 重组人干扰素-α。

人血清白蛋白(human serum albumin，HSA)是机体中一种稳定的且半衰期较 长的蛋白。研究表明许多蛋白药物与人血清白蛋白交联或融合后可以显著地使其半 衰期延长，从而减少用药次数。

美国HGSI(Human Genome Sciences Inc)公司的Albuferon是一个不含接头 的人血清白蛋白和干扰素-α2b的融合蛋白(HSA-IFN-α2b)，在该融合蛋白中干 扰素部分处于融合蛋白的C末端，人血清白蛋白部分处于融合蛋白的N末端。目前 Albuferon已进入了III期临床研究。研究结果表明Albuferon具有较长的体内半 衰期，较高的安全性及较好的疗效。但是，HSA-IFN-α2b存在不均一性和不稳定性 等缺陷。IFN-α2b-HSA是通过改变融合蛋白的相位获得的一个具有更高均一性和稳 定性的新型融合蛋白。IFN-α2b-HSA在提高表达量和回收率，降低生产成本等方面 表现出了明显的优势，具有良好的开发前景。(Zhao HL，Xue C，Wang Y，Li XY， Xiong XH，Yao XQ，Liu ZM.Circumventing the heterogeneity and instability of human serum albumin-interferon-alpha2b fusion protein by altering its orientation.J Biotechnol.2007 Sep 15；131(3)：245-52)，(刘志敏赵洪亮 等：人血清白蛋白-干扰素融合蛋白及其编码基因与应用。中国发明专利申请号： CN 200710099325)。

蛋白药物在生产，存放和使用过程中不可避免要遇到震荡及受热等压力条件， 稳定性较差的蛋白药物必须采用生产成本高，使用不便的冻干剂型。IFN-α2b-HSA 融合蛋白在震荡及受热等压力条件下的稳定性较差，易形成共价聚体。

发明内容

本发明的目的是提供一种人血清白蛋白-干扰素融合蛋白及其编码基因与应 用。

本发明所提供的人血清白蛋白-干扰素融合蛋白，命名为IFN-α2b-HSA(C34S)， 是如下(a)或(b)的蛋白质：

(a)由序列表中序列1的氨基酸残基组成的蛋白质；

(b)将序列表中序列1的氨基酸残基经过一个或几个氨基酸残基的取代和/或 缺失和/或添加且具有干扰素α2b活性的由(a)衍生的蛋白质。

为了使(a)中的IFN-α2b-HSA(C34S)便于纯化，可在由序列表中序列1的 氨基酸残基序列组成的蛋白质的N端或C端连接上如表1所示的标签。

表1.标签的序列