[发明专利]一种姜黄素、脱甲氧基姜黄素和双脱甲氧基姜黄素的制备方法

说明书

技术领域

本发明属于植物化学领域，具体涉及一种从姜黄中制备高纯度姜黄素、脱甲氧基姜黄素和双脱甲氧基姜黄素的分离纯化方法。

背景技术

姜黄素是从姜科姜黄属植物姜黄根茎中提取的一种酚性色素，由于其色泽稳定且毒性很低(小鼠灌胃的LD50＞2g/kg)，目前已广泛应用于食品添加剂和染料中。姜黄的黄色物质为略带酸性的酚性物质，主要含有3种主要成分：姜黄素I(47％)；姜黄素II，即脱甲氧基姜黄素(17％)；姜黄素III，即双脱甲氧基姜黄素(36％)，具有抗肿瘤、抗炎、抗氧化和降血脂等作用，其结构式如下：

姜黄素

脱甲氧基姜黄素

双脱甲氧基姜黄素

初步研究表明，姜黄色素具有抗血管生成作用(Gururaj AE，BelakavadiM，Venkatesh DA，et al.Molecularmechanisms of anti-angiogenic effect ofcurcumin.Biochem Biophys Res Commun，2002，297(4)：934-942.)，同时研究表明，3种姜黄色素单体的抗肿瘤活性包括对内皮细胞生长的抑制作用有明显差异，其中以姜黄素III的生物活性最强，姜黄素III在体内具有明确的抑制A549裸小鼠抑制瘤生长及其血管生成作用，而且传统中药姜黄来源丰富，毒副作用小，可望成为一种低毒副作用的新型抗肿瘤药物。随着人们对姜黄素、去甲氧基姜黄素和双去甲氧基姜黄素单体化合物不同药理活性的进一步认识，单体化合物的分离将有非常重要的意义。

历年以来，由于姜黄素单体不易分离及提纯，采用常规树脂很难将姜黄色素进行分离纯化，目前人们主要从姜黄中提取混合色素，国内没有姜黄素单体的制备方法。美国专利CPI(B)930报道将姜黄素用适当有机溶剂提取，提取物溶于含水极性溶剂，加入过量的非极性溶剂，搅拌后放置得到沉淀，将沉淀物加至丙酮、乙醇或他们的混合物中使之重结晶；美国专利US 6224877报道用水杨酸钠溶液提取总姜黄素，将5g过22目筛的姜黄粗粉加入到100ml3.0mol/l的水杨酸钠溶液中，30℃搅拌8小时，过滤，滤液加400ml水稀释，得到纯度为90.1％的总姜黄素，收率为48.11％。这些提取过程一般要求多级纯化，工艺均属于溶媒提取结晶工艺，使用的溶剂量大，损耗大。同时只能得到总姜黄素而得不到各单体化合物。

中国专利CN 1554634A公开了一种从姜黄中提取姜黄素的制备方法，姜黄经水洗净，粉碎、发酵和加酸水解后，离心分离，用醋酸丁酯从萃取、反萃取得到总姜黄素产品。

中国专利CN 10131799A公开了一种姜黄有效组分的制备方法，将姜黄药材粉碎后加70～95％乙醇提取，在非极性大孔树脂上样后乙醇水洗脱。洗脱液浓缩干燥后再通过工业色谱制备，获得总姜黄色素，含量达到97.3％。该方法虽经过工业色谱制备，但仍不能得到姜黄素、脱甲氧基姜黄素和双脱甲氧基姜黄素三种单体色素。

发明内容

本发明目的是提供一种重现性好，操作简便，可实现规模化生产的从姜黄中制备姜黄素三种单体化合物的分离纯化方法。

为实现本发明目的，本发明涉及的这种姜黄素、脱甲氧基姜黄素和双脱甲氧基姜黄素的制备方法，其特征包括下述步骤：

a提取：将粉碎后的姜黄用2～6倍(v/w)的50％～80％体积浓度的甲醇-酸水溶液或乙醇-酸水溶液室温下连续逆流提取3～6小时，提取液过滤后在50～70℃负压浓缩至相对密度为0.9～1.2的油树脂；

b层析分离：将上述姜黄素油树脂置于HZ-816、HZ-818或HZ-801层析分离介质上进行梯度洗脱，洗脱液分部收集后分别进行负压浓缩，当无水乙醇带水后分别得到姜黄素、脱甲氧基姜黄素和双脱甲氧基姜黄素结晶粉末。

所述甲醇-酸水溶液为甲醇与盐酸水溶液或与乙酸水溶液构成的混合溶液；所述乙醇-酸水溶液为乙醇与盐酸水溶液或与乙酸水溶液构成的混合液，所述甲醇-酸水溶液或乙醇-酸水溶液的pH值为4.0～5.5。

所述负压浓缩的真空度为-0.08～0.1Mpa。

所述梯度洗脱中油树脂的上样量与层析分离介质的质量比为1∶20～100(W/W)。