[发明专利]降解石油、修复石油污染土壤生态菌制剂及其制备方法

权利要求书

1.一种能够降解石油修复石油污染土壤生态的菌制剂，其特征在于：该菌制剂由枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)、荧光假单胞菌(Pseudomonas fluorescens)、粪链球菌(Enterococcusfaecalis)和热带假丝酵母(Candida tropicalis)经优化组合组成的复合菌群，其中各菌组分的配比是1～2∶1∶1∶0.5～1。

2.如权利要求1所述的降解石油修复石油污染土壤生态的菌制剂的制备方法，其特征在于它包括下述步骤：

1)将保存的枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)、荧光假单胞菌(Pseudomonasfluorescens)、粪链球菌(Enterococcus faecalis)和热带假丝酵母(Candida tropicalis)面菌种活化，分别摇瓶培养；基本培养基：可溶性淀粉培养基培养，pH7.0～7.2，0.1Mpa，121℃高压灭菌20～30min；28～30℃培养12～24h；

2)将上述摇瓶培养的各菌群混合，二级液体扩大培养，总体积5～20L，以玉米面代替可溶性淀粉培养基中的可溶性淀粉，并添加0.1％的腐殖酸，其他成分与可溶性淀粉培养基相同，接种量体积百分比为5％～10％，28～30℃培养12～24h；

3)再经三级液体扩大培养，总体积10倍于2)，扩大培养基同2)，接种量体积百分比为5％～10％，28～30℃培养12～24h；

4)以腐殖酸为载体将混合菌群均匀吸附、固定化于腐殖酸上，腐殖酸与步骤3)的扩大培养液重量比为3~5。