[发明专利]CdTe-盐酸多柔比星荧光探针的制备方法

说明书

技术领域

本发明属于半导体和生物标记技术领域，具体涉及荧光探针的制备方法。

背景技术

由于生物体系的特殊性和复杂性，为了能测定更多的生物活性物质，对激光激发生物 荧光探针有很高的要求。目前，应用最为普遍的荧光探针是有机染料，但是，它们的激发 光谱都较窄，所以很难同时激发多种组分；而其荧光发射光谱又较宽，并且分布不对称， 因此要同时检测多种组分较为困难。有机染料最严重的缺陷还有光化学稳定性差，光漂白 与光解使每个染料探针能够发出的荧光光子平均数量不可能太多，光解产物又往往会对生 物体产生杀伤作用。利用半导体量子点作为生物荧光探针就能较好的解决这些问题。首先 与传统的有机染料荧光探针相比，量子点的激发光谱宽，且连续分布，这使得单个波长的 光可同时激发所有的量子点。在生物材料荧光标记领域中的主要优点是可以使用同一激发 光源同时进行多通道的检测。其次，量子点的发射波长可通过控制它的大小和组成来“调 谐”，因而可获得多种可分辨的颜色。如：紫外-蓝光(ZnS，ZnSe)；可见光(CdS，CdSe，CdTe)； 近红外光(CdS/HgS/CdS，InP，InAs)。第三，量子点发射光谱呈对称分布且宽度窄，半高峰 宽(Full Widths HalfMax，FWHM)常常只有40nm或更小。这样就允许同时使用不同光谱 特征的量子点，而发射光谱不出现交叠，或只出现很少交叠，使所标记的生物分子的荧光 光谱易于区分和识别。第四，与有机荧光染料相比，量子点具有较好的光稳定性，不易被 光解或漂白，荧光光谱几乎不受周围环境(如溶剂、pH值、温度等)的影响，它可以经 受反复多次激发，而不像有机荧光分子那样容易发生荧光漂白，量子点的发光寿命比普通 荧光标记染料的寿命长1-2个数量级，量子点的荧光强度是罗丹明6G(R6G)的20倍， 稳定性是它的100倍，光谱线宽只有其三分之一。最后，量子点具有很好的生物相容性， 而有机荧光染料则不具有这种优越性。量子点优良的荧光性质使得它在生物荧光探针标记、 荧光能量转移等许多生物医学研究领域有着广泛的应用前景。但是目前研究主要致力于生 物标记上，具有双功能作用(标记和治疗)量子点探针还未见报道。

发明内容

本发明的目的是提供一种CdTe-盐酸多柔比星荧光探针的制备方法。

本发明的具体步骤如下：

1.原料的制备：

将0.06g的碲粉、0.06gNaBH₄和0.5mL去离子蒸馏水加入氮气饱和了的反应瓶里， 用磁子搅拌器进行搅拌。约过30分钟，溶液为白色絮状，用去离子蒸馏水将其稀释至50mL， 得到0.01mol·L^-1NaHTe溶液。

另取0.03gCdCl₂.2.5H₂O，21μL TGA，100mL去离子蒸馏水置于三角烧瓶中，用稀 的NaOH溶液将其pH值调至9.0，然后边搅拌边通入N₂(约0.5h)，用注射器注入2.5mL 已经制备好的NaHTe溶液，在100℃的条件下回流1h和12h。

用异丙醇纯化CdTe原溶液，再离心、分离，再稀释到所需浓度。

2.所需设备：

三颈圆底烧瓶，电热套，氮气

3.合成步骤：

取0.0007g-0.0014g盐酸多柔比星溶于20.0-30.0mL二次蒸馏水中，以CdTe/盐酸多柔 比星摩尔比为3/1-8/1，与纯化后的橙红色CdTe溶液混合，调节体系的pH值为中性，在氮 气的保护下，将反应体系加热到40-80℃，冷凝回流20min-40min，即得CdTe-盐酸多柔比 星荧光探针。以上原料配比可按比例放大。

本发明采用表面修饰技术，得到新型量子点荧光探针，在紫外灯照射下可得到很强的 荧光，通过光谱分析，发现CdTe-盐酸多柔比星探针具有良好的荧光特性。研究发现，采 用本发明制备的CdTe-盐酸多柔比星探针与多肽存在着较强的相互作用，并已经成功地用 于肝癌细胞的标记。

本发明具有材料合成方法简单，组成易于控制，成本相对低廉，得到的量子点探针荧 光特性好等优点。

附图说明

图1为CdTe-盐酸多柔比星探针的荧光光谱图

图2为CdTe量子点与CdTe-盐酸多柔比星探针在紫外灯下的照片

图3为CdTe-盐酸多柔比星探针的电镜照片