[发明专利]包埋玻璃化超低温保存山药种质的装载液及其使用方法

说明书

技术领域：

本发明涉及一种种质保存方法，特别是一种包埋玻璃化超低温保存山药种质的装载液及其使用方法。

背景技术：

山药既是一种深受人们喜爱的食品，又是一种药用价值很高且应用广泛的中药材，尤其怀山药，其药用价值更高。然而，对山药种质的保存技术仍沿用传统的方法，许多珍贵种质资源丢失，不能适应现在日益增长的需求量的要求。超低温保存技术是目前保存期长、品质稳定、应用成熟的一种种质保存方法。20世纪90年代出现了包埋玻璃化法超低温保存技术，它综合了玻璃化法和包埋脱水法的优点，而克服了包埋干法操作繁琐及细胞内外冰晶的形成和玻璃化法的毒性。目前已在苹果、薄荷、草莓、柿、山葵、甘薯、大蒜等得到成功应用。此种方法由继代培养、低温练苗、预培养、包埋、装载和脱水处理、液氮保存、保存后化冻和洗涤及再生培养等环节组成。然而，经过试验这种方法在山药种质的保存中应用未能成功，经研究其原因之一是装载时所用的装载液不适于山药种质。

发明内容：

本发明的目的是提供一种能将包埋玻璃法超低温保存技术应用在山药种质保存的包埋玻璃化超低温保存山药种质的装载液及其使用方法。本发明的技术方案是，一种包埋玻璃化超低温保存山药种质的装载液，包括甘油和二甲基亚砜及蔗糖，其特征在于：甘油的浓度为1.8％，二甲基亚砜的浓度为5％，蔗糖的浓度为14％。一种包埋玻璃化超低温保存山药种质的装载液使用方法，其特征在于：包埋珠置于权利要求1所述装载液中在0℃下装载30-120分钟。本发明与现有技术比较具有操作简单、种质保存时间长且保存后山药种质遗传稳定性好的显著优点。

具体实施方式：

本发明为了解决将包埋玻璃化法超低温保存种质的技术应用于山药种质的保存，对包埋玻璃化法超低温保存种质技术中的装载液进行了研究和改进，所改进的装载液为：1.8％的甘油、5％的二甲基亚砜和14％的蔗糖混合液。

本发明的装载液使用方法，将被包埋的怀山药包埋珠置于上述装载液中在0℃下装载30-120分钟，便可用玻璃化保护剂对包埋珠进行脱水处理。