[发明专利]猪胚胎的移植器械及其移植方法

说明书

技术领域

本发明涉及一种猪胚胎的移植器械及其移植方法，属于胚胎移植领域。

背景技术

猪胚胎移植试验成功最早于1951年由Kvashickii报道。到20世纪60年代，已经基本建立了外科手术方法采集和移植胚胎的技术。到70年代以后，北美和欧洲开始将胚胎移植技术应用于向闭锁猪群引进外血和国际间的引种。80年代转基因动物技术的出现，促进了胚胎移植技术的应用和发展。1985年Hammer等人，首先将人生长激素基因应用显微注射技术注入猪的受精卵，然后应用胚胎移植技术将其移入受体母猪的输卵管，得到转基因猪。这之后，国际上各种转基因的胚胎，包括用显微注射法、精子介导法、体细胞核移植法和其它方法获得的转基因胚胎，通过胚胎移植技术生产出转基因猪；各种胚胎工程获得的胚胎，如体外受精的胚胎、胚胎细胞核移植和体细胞核移植的重构胚胎，通过胚胎移植技术获得“试管猪”和“克隆猪”。

我国最早建立猪胚胎移植技术的是湖北省农科院魏庆信等人，1989年他们将猪的囊胚期胚胎移入受体母猪的子宫角，得到胚胎移植的后代；1992年，将体外受精的胚胎，移植到母猪的输卵管，得到“试管猪”；1997年，将胚胎细胞核移植的重构胚胎，移植到母猪的输卵管，得到“克隆猪”；先后将七种外源基因导入猪的受精卵，通过胚胎移植技术得到了相应整合并表达的转基因猪。中国农科院畜牧研究所冯书堂等人，于1990年建立了猪的胚胎移植技术，并得到胚胎移植的仔猪。进入21世纪以来，中国农业大学、东北农业大学、上海农科院畜牧兽医研究所等单位，先后应用胚胎移植技术，将克隆胚胎或转基因的胚胎移入母猪的生殖道，获得克隆猪或转基因猪。

国内外猪胚胎移植已有技术的特征是：进行输卵管移植时，用移卵管直接从输卵管伞部插入输卵管；进行子宫角移植时，用移卵管直接插入子宫角。该技术的缺陷有三点：

1、移卵管难以插入较深的部位，尤其是进行输卵管移植时，很难插入输卵管的壶腹部，至使胚胎不能移到最合适的部位，从而影响胚胎移植的成功率。

2、移卵管直接从输卵管伞部插入输卵管，或直接插入子宫角，在插入的过程中，由于输卵管内膜或子宫角内膜上粘液的吸附作用，很容易造成胚胎的丢失，从而影响胚胎移植的效率。

3、移卵管直接从输卵管伞部插入输卵管，或直接插入子宫角，在操作的过程中稍有不慎，或受体母猪稍有骚动，由于移卵管为玻璃质地，很容易折断或破碎，从而造成移植失败，严重的还会造成受体母猪生殖道的损伤。

专利CN200520103507.6涉及的是人的胚胎移植，CN200510105236.2涉及的是牛的胚胎移植，但是它们均为非手术移植，其中的外套管只是用来保护其内芯。同时由于各种动物生殖道的形态结构不相同，胚胎移植所用的器械和方法也不相同，如果应用以上两篇专利的技术方案不能进行猪的胚胎移植，也就不能克服已有猪胚胎移植技术的三点缺陷。

发明内容

本发明的目的在于提供一种猪胚胎的移植器械及其移植方法，为手术移植，有效地克服了已有猪胚胎移植技术的三点缺陷，大大提高了胚胎移植的成功率，操作方便。

猪胚胎的移植器械，包括移卵管，其特征在于：还包括输卵管移植用外套管或子宫角移植用外套管，移卵管在各外套管内部；输卵管移植用外套管是长65-70mm、管腔直径3-4mm、管壁厚0.1-0.2mm的硬质、有弹性的塑料细管，两端磨平滑；子宫角移植用外套管是长65-70mm、管腔直径3-4mm、管壁厚0.1-0.2mm的硬质、有弹性的塑料细管，其一端剪成15°-20°斜面，另一端磨平滑。

猪胚胎的移植方法，受体母猪麻醉保定后手术切口，将输卵管和卵巢引出切口之外或将子宫角引出切口之外；其特征在于：(1)输卵管移植方法步骤如下：先将输卵管移植用外套管从输卵管伞口插入输卵管，用手将输卵管沿外套管向前捋，直至壶腹部；然后将吸有胚胎的移卵管插入外套管，直至用手能感觉到移卵管已穿过外套管，再将外套管退出1-2公分；最后将移卵管内的胚胎和培养液移入输卵管内；移植完毕，小心将移卵管和外套管退出，复原输卵管伞，按常规缝合创口；(2)子宫角移植方法步骤如下：先将子宫角移植用外套管15°-20°斜面端从子宫角的合适部位避开血管插入子宫角内腔，外套管进入子宫角内腔的深度4-5公分，用手感确认外套管在子宫腔内；然后将吸有胚胎的移卵管插入外套管，直至用手能感觉到移卵管已穿过外套管0.5-1公分；最后将移卵管内的胚胎和培养液移入子宫角内；移植完毕，小心将移卵管和外套管退出，复原子宫角，按常规缝合创口。