[发明专利]丝网印刷电极在测定5-羟色胺中的应用

说明书

技术领域

本发明涉及丝网印刷电极及在生物样品内5-羟色胺(5-HT)含量测定中的应用。

背景技术

5-羟色胺是人体内一种重要的神经传递物质，它参与许多生命疾病过程，研究表明抑郁症的发生与5-羟色胺水平有着密切关联。目前临床抑郁症的诊断，主要根据病人的病史和临床表现，通过量表或心理诊断完成，如汉密顿抑郁量表(HAMD)，其准确率不高，易误诊。寻找快速，准确的5-HT测定方法，能够实现临床快速检验，具有重要的医学意义。现行5-HT浓度测定方法主要为高效液相色谱法，方法繁琐、样本需求量大、耗时长，基本无法用于临床诊断。

电分析方法具有灵敏度高、选择性好，响应时间短等优点，被广泛应用于此类生命物质的直接检测。目前应用于5-羟色胺检测的电极已有许多，多为柱状微电极，成本高，多次使用后需要重新修饰，面临重现性问题。本发明中采用的丝网印刷电极批次制作，即用即抛，价格低廉，并且采样量少，与5-HT临床检测的要求非常吻合。

在人体血液和大脑等生物样品中，5-HT含量相对比较低，共存高浓度的抗坏血酸和尿酸等物质具有与其极其相近的电化学性质，在测定的过程中必然引起相应的干扰。所以开发出高灵敏度，高选择性的测定5-HT的电化学传感器成为人们亟待解决的问题。

胶体金也称金溶胶，是由金盐被还原成原金后形成的金颗粒悬液。胶体金颗粒由一个基础金核(原子金Au)及包围在外的双离子层构成，紧连在金核表面的是内层负离子(AuCl₂^-)，外层离子层H⁺则分散在胶体间溶液中，以维持胶体金游离于溶胶间的悬液状态。胶体金具有高电子密度特性，能够加快电子的传递，提高电活性物质的响应灵敏度。本发明利用该特征，预提高该电极对5-HT的响应灵敏度。

Nafion是阳离子交换剂的典型代表。可以在适当条件下溶于有机溶剂，故而可以浇铸在电极表面形成一层稳定的修饰膜。对有机阳离子的选择性特别高。本发明使用该膜来除去尿酸和抗坏血酸的干扰。

发明内容

本发明就是针对上述问题提供丝网印刷电极在测定5-羟色胺中的应用，丝网印刷电极测定5-羟色胺具有较高的灵敏度且成本较低。

本发明提供的技术方案是：丝网印刷电极在测定5-羟色胺中的应用。

所述丝网印刷电极，包括电极基片，基片上印制有碳电极、对电极和Ag/AgCl电极，各电极分别对应连接有一根电极引线。

所述电极引线上覆盖有表面绝缘层。

制作上述碳电极的碳油墨中含有胶体金颗粒；碳电极表面涂覆有一层敏感膜。

上述敏感膜由下法得到：将0.01％～10％(g/ml)nafion溶液涂覆在碳电极表面，挥干溶剂得到敏感膜。

本发明用丝网印刷电极测定5-羟色胺具有较高的灵敏度且成本较低。

本发明涂覆在碳电极表面的nafion膜的用量优选为2～30μL。制作碳电极的每毫升碳油墨中含有0.01～100μg的胶体金颗粒。

胶体金颗粒由一个基础金核(原子金Au)及包围在外的双离子层构成，紧连在金核表面的是内层负离子(AuCl^2-)，外层离子层H⁺则分散在胶体间溶液中，以维持胶体金游离于溶胶间的悬液状态。胶体金具有高电子密度特性，能够加快电子的传递，提高电活性物质的响应灵敏度。

Nafion是阳离子交换剂的典型代表。可以在适当条件下溶于有机溶剂，故而可以浇铸在电极表面形成一层稳定的修饰膜。对有机阳离子的选择性特别高。

本发明结合胶体金加快电子传递速度和nafion进行阳离子选择的特点制作的丝网印刷电极，测定5-HT浓度，不仅选择性和灵敏度高，并且在很高浓度的抗坏血酸和尿酸存在下，对5-HT有选择性响应。

附图说明

图1为本发明丝网印刷电极的结构示意图；

图2、3、4为本发明对小鼠全血样本中5-HT的选择性响应图；

图5为不同剂量利血平耗竭小鼠分别于0、2、3、5、9h血、脑中5-HT浓度及行为评分变化趋势相关性考察图；

其中a-血中5-HT浓度，b-脑中5-HT浓度，c-行为学评分值，图5中上图-0.25mg/kg利血平，中图-0.5mg/kg利血平，下图-2.0mg/kg利血平。图中左边y坐标轴c表示浓度，右边y坐标轴表示评分值。横坐标表示时间。

具体实施方式