[发明专利]一种棉酚快速检测试纸条及制备方法与应用

说明书

技术领域

本发明涉及化学测试分析技术领域，具体的说，涉及一种棉酚检测试纸条及制备方法与应用。

技术背景

棉酚(gossypol)又名棉子醇或棉毒素，是棉属植物体内的一种黄色多酚型物质，存在于棉株的各部器官，以棉籽仁中含量最高。棉酚的分子式为C₃₀H₃₀O₈，其分子结构中含有非常活泼的羟基和醛基。棉酚溶于甲醇、乙醇以及丙酮等有机溶剂，不溶于水和低沸点的石油醚。棉酚呈弱酸性，能与氢氧化钠、碳酸钾的水溶液反应，生成二钠盐或二钾盐。同时极易被过氧化氢、费林试剂等许多氧化剂氧化，甚至被空气中的氧气氧化而变质。

棉酚在棉籽油、棉籽蛋白等中的存在形式可分为游离棉酚(FG)和结合棉酚(BG)，其中游离棉酚是一种有毒的化学物质(最近有文献报道结合棉酚也有毒)，过量的吸收，能够影响人的生育功能，急性中毒常出现皮肤和胃灼烧、恶心、呕吐、腹泻、头痛，危急时下肢麻痹、昏迷、抽搐、便血，乃至因呼吸、循环系统衰竭而死亡。普通的棉籽仁中含有棉酚0.20-2.0％，加工后的棉籽产品中含棉酚0.06-2％，远超过国际食用卫生标准0.045％。

棉酚的检测方法很多，目前主要应用的有紫外分光光度法、比色法、高效液相色谱法、原子吸收分光光谱法、红外光谱法、气相色谱法、流动注射法、极谱法以及薄层层析法等。其中紫外分光光度法、比色法、高效液相色谱法是较常用的方法。紫外分光光度法(UV)是测定样品中FG的一种国标方法。首先用纯棉酚标样配成一系列不同浓度的溶液，在378nm处测定吸光度，制作标准工作曲线，然后将样品中的FG用70％丙酮提取，同样在378nm处测定其吸光度，再根据其吸光度的大小与标准工作曲线比较定量。分光光度法是在国内外应用较普遍的一种检测方法。分光光度法又分为苯胺法、三氯化锑法、甲氧基苯胺法和间苯三酚法。其中苯胺法应用最多，该方法不仅是检测FG的另一种国标方法，也是美国油脂化学协会(AOCS)认可的分析方法。苯胺法是用70％丙酮试剂提取样品中FG后，在95％乙醇溶液中，加苯胺试剂与FG反应生成黄色物质二苯胺棉酚，再于445nm处测吸光度，然后与标准工作曲线比色定量。高效液相色谱法(HPLC)具有高效、高速、高灵敏度等特点，将HPLC用作棉酚检测在国内外已研究多年。但是因为流动相、萃取剂及色谱柱等因素的差异，而使得结果大多数不太满意。目前，以甲醇一水一磷酸作流动相的报道较多。HPLC法的关键在于选择合适的萃取剂、流动相和色谱柱。

以上关于棉酚的检测方法各有优劣，有的检测方法灵敏度高，有的检测方法选择性好，但存在仪器昂贵，操作复杂，专业性强，不利于普及等缺点。因此，在棉籽的深加工前及深加工过程中，很有必要探索出一种快速、准确、简便的方法来检测棉籽中的游离棉酚含量，以便能及时、准确、有效地监控原料和产品的质量。

发明内容

本发明的目的是针对现有检测技术的不足，提供一种灵敏度高，显色效果好的棉酚检测试纸条及其制备方法，并将该棉酚检测试纸条用于棉籽油、棉籽蛋白等产品中棉酚含量的快速检测。

本发明通过以下技术方案实现：

一种棉酚快速检测的试纸条，它包括下列试剂：

①显色剂乙酰丙酮铁或三氯化铁或硫酸铁：0.01-0.05mol/L；

②盐酸，冰醋酸的混酸溶液：摩尔比为1∶2；

③络合剂邻非啰啉：质量百分比为0.36％-0.5％；

④固载剂硅溶胶或可溶性淀粉：质量百分比为1％-5％；

它是按照以下步骤制备的：

(1)按配方量称取显色剂溶于100ml乙醇中，使其摩尔浓度至0.01-0.05mol/L，取其中10ml溶液稀释至0.002mol/L；按配方量称取络合剂溶于盐酸和冰醋酸的混酸溶液中，使该溶液的质量百分含量至0.36-0.5％，等体积混合所述的显色剂、络合剂和乙醇得到棉酚试剂盒；

(2)按配方量称取所述的固载剂加入到蒸馏水中，加热溶解得到浓度为1-5％的溶液A；按配方量称取络合剂加入到盐酸和冰醋酸的混酸溶液中，搅拌溶解，使其浓度至0.36％-0.5％；按配方量称取所述的显色剂溶于乙醇中，使其摩尔浓度为0.01-0.05mol/L；等体积混合络合剂，显色剂和乙醇，得到溶液B；将溶液A与溶液B按体积比为1∶10混合组成显色液；将滤纸浸入到所述的显色液中，按照每1cm²的滤纸加入1mL的显色液，室温下干燥，剪切，包装，得到所述的棉酚检测试纸条；