[发明专利]一种活体磁性微生物的制备方法

权利要求书

1.一种活体磁性微生物的制备方法，包括以下步骤：

(1)按常规方法活化培养待磁化微生物；

(2)对于细胞表面带负电荷的微生物，将聚阳离子和聚阴离子交替吸附在经活化培养的微生物细胞表面，并使微生物细胞最外层为聚阴离子；对于细胞表面带正电荷的微生物，则将聚阴离子和聚阳离子交替吸附在经活化培养的微生物细胞表面，并使微生物细胞最外层为聚阴离子，得到细胞最外层为聚阴离子的微生物菌悬液，所用的聚阳离子和聚阴离子为对所选待磁化微生物代谢功能和细胞结构不造成破坏的聚阳离子和聚阴离子。

(3)在细胞最外层为聚阴离子的微生物菌悬液中加入CaCl₂溶液和磁性纳米颗粒水溶液，然后，再用NaOH溶液使微生物菌悬液的pH维持在弱酸性的条件下缓慢滴加Na₂HPO₄溶液，使反应生成的磷酸钙沉淀均匀的沉积在微生物细胞表面，同时使磁性纳米颗粒也均匀地掺入到磷酸钙的沉积层中。

2.根据权利要求1所述的活体磁性微生物的制备方法，其特征在于，所述的待磁化微生物，可以是真菌或细菌。

3.根据权利要求1所述的活体磁性微生物的制备方法，其特征在于，所述的待磁化微生物，是表面带有正电荷的或负电荷的微生物。

4.根据权利要求1所述的活体磁性微生物的制备方法，其特征在于，所述的待磁化微生物，其形态可以是球状、杆状或螺旋状。

5.根据权利要求1所述的活体磁性微生物的制备方法，其特征在于，所述的活化培养待磁化微生物的方法是：选取待磁化微生物菌种，按常规方法接种至液体培养基活化培养至微生物培养液中的细胞浓度为10⁶～10⁸mL^-1；

6.根据权利要求1所述的活体磁性微生物的制备方法，其特征在于，所述的将聚阳离子和聚阴离子交替吸附在经活化培养的带负电荷的微生物表面，并使微生物细胞最外层为聚阴离子的具体方法包括以下步骤：

a)清洗微生物细胞表面：取一定体积的活化培养后的微生物培养液转移至离心管中，用合适的离心转速及离心时间离心，弃上清液，加入与所取活化培养后的微生物培养液等体积的去离子水，摇匀使微生物细胞形成菌悬液，将该步骤中的离心、弃上清液、加入等体积的去离子水、摇匀的过程重复进行1～3次；

b)细胞表面聚阳离子的吸附：将菌悬液离心，弃上清后加入与步骤a)中所加去离子水等体积的质量百分比为0.01～0.5％的聚阳离子稀溶液，摇匀后静置10～30分钟；

c)除去菌悬液中未吸附的聚阳离子：将步骤b)处理过的菌悬液离心，弃上清，加入与步骤a)中所加去离子水等体积的去离子水，摇匀，将该步骤中的离心、弃上清、加入去离子水、摇匀的过程重复进行1～3次；

d)细胞表面聚阴离子的吸附：将步骤c)处理过的菌悬液离心，弃上清，加入与步骤a)中所加去离子水等体积的质量百分比为0.01～0.5％的聚阴离子稀溶液，摇匀后静置10～30分钟；

e)除去菌悬液中未吸附的聚阴离子：将步骤d)处理过的菌悬液离心，弃上清，加入与步骤a)中所加去离子水等体积的去离子水，摇匀，将该步骤中的离心、弃上清、加入去离子水、摇匀的过程重复进行1～3次；

f)聚阳离子和聚阴离子在微生物细胞表面的交替吸附：将步骤b)、c)、d)、e)依次重复进行1～4次，得到细胞最外层为聚阴离子的微生物菌悬液。