[发明专利]柏树木层孔菌菌株及其子实体培养方法

权利要求书

1.一种柏树木层孔菌药用菌(Phellinus sp.)菌株及其子实体培养方法，其特征在于：寄生在柏树树干上，用柏树木屑进行栽培，菌丝体和子实体具有药用用途。

2.根据权利要求1所述的柏树木层孔菌药用菌菌株，所述的菌株形态特征是，在PDA培养基上可以缓慢生长，生长速度为2～3mm/d，在松针蛋白胨葡萄糖酵母粉培养基上生长速度为3～4mm/d。菌落圆形、致密、黄白色、边缘不整齐，气生菌丝不发达，菌丝体贴在培养基表面生长。子实体群生、单生、迭生于活的柏树树干表面，多年生。单个菌盖10～20×20～30×10～20cm，半圆形或椭圆形，表面黑褐色，边缘黄色或黄褐色、黄白色，有同心圆环带，表面不均匀。菌肉黄褐色，木质，3～5层，横切面三角形，厚度为5～10cm。菌管多层，长度10～15cm，黄褐色，下表面黄色，光滑无突起。菌孔密生，椭圆形，2～4个/mm。孢子印黄色。孢子近圆形、方椭圆形，光滑，黄色，中有一球状物，6.5～8.5μm×4.5～5.5μm。菌丝体系统2型，有锁状联合，生殖菌丝直径2.5μm，联络菌丝1.0μm～1.5μm。

3.根据权利要求1所述的柏树木层孔菌药用菌菌株，所述的菌株的生理特征是：木层孔菌菌丝生长的温度范围是3～35℃，最适温度25～28℃；子实体分化的温度范围10～25℃，最适温度15～25℃；0～10℃的温差昼夜刺激有利于子实体的分化；孢子萌发的温度范围是10-30℃，最适温度25℃；菌丝能在pH 3～10范围内生长，最适pH4.5～5.5。

4.根据权利要求1所述的柏树木层孔菌药用菌菌株，所述的菌株的营养需求特征是：该菌能利用纤维素、木质素、淀粉、葡萄糖、蔗糖、果糖、玉米粉、乳糖和甘露糖作碳源，其中葡萄糖和蔗糖为碳源生长势强，果糖、木质素上生长势弱；蛋白胨、硫酸铵、硝酸铵、尿素、黄豆粉、玉米粉和麦麸均可作为氮源，在麦麸、蛋白胨上生长速度快，长势旺盛；硫酸铵、硝酸铵和尿素虽能作为氮源，但长势很弱；能在C/N＝10/1～45/1的范围内生长，C/N为30/1时生长速度最快。在完全黑暗的条件下不能形成子实体，需要一定强度的散射光照射才能形成子实体，子实体生长允许阳光直射。

5.根据权利要求1所述的柏树木层孔菌药用菌菌株，所述的菌株的栽培条件特征是：栽培原料可以使用柏树木屑、阔叶树木屑、棉籽壳、麸皮、米糠、玉米粉等，培养料含水量60％～63％，pH为5～6。栽培季节为3～10月，出菇温度不超过28℃，空气相对湿度为70％～90％。培养料必须经过高压(0.1MPa，1～1.5h)或常压灭菌(100℃，8～10h)。栽培方式为瓶栽或袋栽。

6.根据权利要求1所述的柏树木层孔菌药用菌菌株子实体培养方法，所述的菌株的菌丝体培养方法是：琼脂培养基配方：(1)柏树汁葡萄糖蛋白胨培养基：柏树树叶或树枝50～100g，葡萄糖20g，蛋白胨2～4g，琼脂20g，水1000mL，pH自然。(2)松针汁葡萄糖蛋白胨培养基：松针50～100g，葡萄糖20g，蛋白胨2～3g，琼脂20g，水1000mL，pH自然。(3)PDA加富培养基：马铃薯200g，蔗糖20g，蛋白胨3～5g，酵母粉2g，琼脂20g，水1000mL，pH自然。

液体培养基：上述配方中不添加琼脂。

试管菌种接种后培养在25～28℃，满管时间一般为20～30d。液体培养用三角瓶或输液瓶，分装总体积1/3的培养液，灭菌后冷却接种，接种量为2％～5％。在25℃的震荡摇床上，转速为120～150r/m，培养7～10d。

7.根据权利要求1所述的柏树木层孔菌药用菌菌株子实体培养方法，所述菌株的子实体培养方法是：培养料配方：(1)柏树木屑或1～2cm长的短枝条节75％～80％，麦麸或米糠25％～20％，含水量60％～63％。(2)棉籽壳80％，麦麸或米糠20％，含水量60％～63％。(3)阔叶树木屑80％，麦麸或米糠20％，含水量60％～63％。

各配方中的干原料混合均匀，加入料水比为1∶1～1.2的1％醋酸水溶液，搅拌均匀，堆积，塑料薄膜覆盖，处理24～48h。加入干原料总量0.5％的石灰粉，搅拌均匀，堆积12h。

处理好的培养料装入瓶或袋内，灭菌，冷却，接种量5％～10％。在25～28℃条件下培养，空气相对湿度为60％～70％，经过40～60d，菌丝体长满全部培养料。菌种瓶满瓶后可以作为菌种用于生产出菇的菌袋，可以直接进行出菇，菌丝满袋后直接进行出菇管理。

在室内或大棚中均可以出菇。气温为10～25℃，不超过30℃。空气相对湿度保持在70％～90％，不超过95％。一定的散射光照，良好的通气，10d后开始在瓶口或菌袋两端、菌袋表面等处形成子实体原基。原基长到1～2cm大后可以直接向子实体上轻轻喷水，每天2～3次。子实体先松软，后逐渐变硬，边缘黄白色，中央渐渐变为深褐色，并开始弹射孢子。子实体生长时间为3～4个月。边缘完全变成深色后进行采收。