[发明专利]一种IL-2基因的原位杂交检测试剂盒及其检测方法和应用

说明书

【技术领域】

本发明涉及一种试剂盒，具体地说关于一种IL-2基因的原位杂交检测试剂盒及其检测方法和应用

【背景技术】

癌症也叫恶性肿瘤，肿瘤是指机体在各种致瘤因素作用下，局部组织的细胞异常增生而形成的局部肿块。癌症病变的基本单位是癌细胞。人体细胞老化死亡后会有新生细胞取代它，以维持机体功能，人体绝大部分细胞都可以增生，但这种增生是有限度的，而癌细胞的增生则是无止境的，这使患者体内的营养物质被大量消耗。同时，癌细胞还能释放出多种毒素，使人体产生一系列症状，晚期时它转移到全身各处生长繁殖，最后导致人体消瘦、无力、贫血、食欲不振、发热及脏器功能受损等，器官功能衰竭而死亡。

根据国内外权威机构提供的资料，我国每年癌症的新增人数160万，死亡人数近160万，患者600万，全球每年新增癌症患者800万，死亡人数接近800万，患者约有8400万人，到2020年以上人数将翻一番，这是一组可怕的数字。而且，绝大部分癌症患者都只有很短的生存期，人类到目前为止还没战胜癌症这一恶疾，如何做到治愈癌症的关键是要做到基因水平的早期诊断。

IL-2是细胞因子，它在肿瘤的发生过程中起十分重要的作用，一旦机体IL-2的表达降低，肿瘤就会朝恶性方向发展。IL-2通过以下几方面的功能作用来达到消灭和杀死癌细胞：1.IL-2是淋巴T细胞的生长因子，能延长T细胞的活性，刺激T细胞进入细胞分裂周期，增强T细胞的杀伤活性；在体内能增强抗原诱导的细胞毒性T细胞(TC)的活性，可以辅助抗原和半抗原直接在体内诱导产生(TC)。二者均能对癌细胞进行攻击和杀伤作用。2.可促进NK细胞的增殖，维持NK细胞的长期生长。肿瘤病人经IL-2治疗后，血中NK细胞数量明显增加。3.IL-2可促进LAK、TIL细胞的功能活性，同时能延长LAK、TIL细胞存活，也能扩增和活化LAK、TIL细胞，LAK是淋巴细胞与IL-2接触后产生的一种具有高效抗肿瘤效应的杀伤细胞，只有在IL-2存在下LAK才能产生，也只有在IL-2的存在下LAK才能发挥效果。4.可促进B细胞的增殖和产生免疫球蛋白，并刺激巨噬细胞，提高巨噬细胞的吞噬能力。5.IL-2能刺激NO(一氧化氮)的产生，消灭癌细胞。IL-2通过以上等途径来消灭癌细胞，当癌症发生时机体的IL-2分泌会降低，同样机体IL-2的降低也会使癌细胞生长。人类的各种癌症都有IL-2的表达降低，IL-2在血液中的浓度变化可用于癌症病人的早期的检测和预测指标。

癌症从癌前变到形成癌症，需要几年时间，如何做到早期检测和诊断及预后的检测及诊治后的复发、转移早期检出，是降低发病率和死亡率的关键。采用核酸原位杂交技术检测IL-2基因，对癌症的早期基因水平的诊断有重要的临床价值。IL-2基因序列号：NM_000586，822bp，mRNA，4q26-q27″，cds：56…517bp。

随着分子生物技术日益完善，功能基因组学，癌症基因组学等研究的深入展开，至今，我们已有可能在基因水平上做更精确的早期诊断，在癌变前期或癌细胞形成(单克隆时)就能做到早期预测诊断。

原位杂交技术(in situ hybridization)是将分子生物学与细胞化学技术结合起来，以标记的核酸分子为探针，在组织细胞原位检测特异性核酸分子的技术。其原理是使含有特异序列、经过标记的核酸单链(即探针)，在适宜条件下与组织细胞中的互补核酸单链即靶核酸发生杂交，再以放射自显影或免疫细胞化学方法对标记探针进行探测，从而在细胞原位显示特异的DNA或RNA分子。

【发明内容】

本发明的目的是针对现有技术中的不足，提供一种IL-2基因的原位杂交检测试剂盒的用途。

本发明的再一的目的是，提供一种IL-2基因的原位杂交检测试剂盒。

本发明的另一的目的是，提供一种IL-2基因的原位杂交检测方法。

为实现上述目的，本发明采取的技术方案是：

一种IL-2基因的原位杂交检测试剂盒在制备检测癌症疾病药物中的应用，所述的试剂盒包括杂交探针、标记物，所述的杂交探针序列如SEQ ID NO.1所示。

所述的杂交探针序列如SEQ ID NO.1所示的RNA序列。

所述的标记物选自放射性核素或非放射性标记物。

所述的放射性核素选自³H、³⁵S、¹²⁵I或³²P中的一种。

所述的非放射性标记物选自生物素、地高辛、碱性磷酸酶、辣根过氧化酶或荧光素中的一种。