[发明专利]液相色谱和质谱联用时在线浓缩样品的装置无效
申请号: | 200910055277.3 | 申请日: | 2009-07-23 |
公开(公告)号: | CN101598706A | 公开(公告)日: | 2009-12-09 |
发明(设计)人: | 聂磊;徐国宾;杨芃原 | 申请(专利权)人: | 上海华质生物技术有限公司 |
主分类号: | G01N30/00 | 分类号: | G01N30/00 |
代理公司: | 上海光华专利事务所 | 代理人: | 李仪萍;余明伟 |
地址: | 200433上海市*** | 国省代码: | 上海;31 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 色谱 联用 在线 浓缩 样品 装置 | ||
技术领域
本发明涉及到一种液质联用时样品的处理技术,更具体的说是在液相色谱和电喷雾质谱联用时实现在线浓缩样品的装置。
背景技术
质谱的电喷雾技术是一种软电离技术,最早由Fenn等提出。其使用强静电场来进行电离,适合于蛋白质等大分子物质的分析,Fenn也因为这个贡献获得的2002年的诺贝尔化学奖。
随着蛋白质组学的发展,利用液相色谱和质谱联用来分离和鉴定蛋白已经成为蛋白质组学分离鉴定的主流分析方法,而在液质联用(LC-MS)中,液相色谱/电喷雾质谱(LC-ESI-MS)是蛋白等大分子鉴定的重要手段。而生物大分子在制备过程中由于过柱纯化等等使样品变得很吸,为了保存和鉴定,往往进行浓缩。
常用的浓缩方法有:1、减压加温蒸发浓缩:通过降低液面压力使液体沸点降低,减压的真空度愈高,液体沸点降得愈低,蒸发愈快;2、空气流动蒸发浓缩:空气的流动可使液体加速蒸发,铺成薄层的溶液,表面不断通过空气流;或将生物大分子溶液装入透析袋内置于冷室,用电扇对准吹风,使透过膜外的溶剂不沁蒸发,而达到浓缩目的,此法浓缩速度很慢;3、冰冻法:生物大分子在低温结成冰,盐类及生物大分子不进入冰内而留在液相中,操作时先将待浓缩的溶液冷却使之变成固体,然后缓慢地融解,利用溶剂与溶质融点介点的差别而达到除去大部分溶剂的目的。如蛋白质和酶的盐溶液用此法浓缩时,不合蛋白质和酶的纯冰结晶浮于液面,蛋白质和酶则集中于下层溶液中,移去上层冰块,可得蛋白质和酶的浓缩液。4、吸收法:通过吸收剂直接吸收除去溶液中溶液分子使之浓缩。所用的吸收剂必需与溶液不起化学反应,对生物大分子不吸附,易与溶液分开。常用的吸收剂有聚乙二醇,聚乙稀吡咯酮、蔗糖和凝胶;5、超滤法:超滤法是使用一种特别的薄膜对溶液中各种溶质分子进行选择性过滤的方法,液体在一定压力下(氮气压或真空泵压)通过膜时,溶剂和小分子透过,大分子受阻保留,这是近年来发展起来的新方法,最适于生物大分子尤其是蛋白质和酶的浓缩或脱盐,并具有成本低,操作方便,条件温和,能较好地保持生物大分子的活性,回收率高等优点。
综上所述,上述方法都不适合在线联用时进行浓缩,对于那些微量的蛋白质常规的液质联用是不能够检出的,因此需要在线浓缩。
鉴于此,有必要提供一种液相色谱和质谱联用时在线浓缩样品的装置以解决上述问题。
发明内容
本发明涉及液相色谱和质谱联用时在线浓缩样品的装置,用于解决微量蛋白质在线浓缩的问题,可以提高质谱的灵敏度,提高谱图的质量,尤其是可以提高串级谱图的质量。
为了解决上述问题,本发明采用如下的技术方案:液相色谱和质谱联用时在线浓缩样品的装置,其包括基部,设置于基部上的亲水性微通道以及一端与液相色谱馏分连通,另一端与亲水性微通道连通的连接件,该装置进一步包括用于加热亲水性微通道的红外激光模块或者固定于亲水性微通道下方采用电加热的导热陶瓷。
本发明通过设置红外激光模块,利用其发射的红外激光加热基部,尤其是加热基部上设置的亲水性微通道或者利用固定于亲水性微通道下方的导热陶瓷加热从而实现对样品进行在线浓缩,可以提高质谱的灵敏度,获得高质量的谱图,尤其当样品量极其少的时候可以大幅度的提高其检出和测定能力。
附图说明
图1为本发明在线浓缩样品的装置一实施例结构示意图;其中F表示溶剂蒸发方向;
图2为本发明在线浓缩样品的装置另一实施例结构示意图;
图3为本发明在线浓缩样品的装置又一实施例结构示意图;
图4为本发明在线浓缩样品的装置再一实施例结构示意图。
具体实施方式
下面结合附图进一步说明本发明的具体实施步骤。
实施例一
如图1所示,一种液相色谱和质谱联用时在线浓缩样品的装置,该装置包括基部,设置于基部上的通孔13,设置于基部上并与通孔13连通的亲水性微通道14以及一端与液相色谱馏分11连通,另一端与通孔13连通的连接件10。本实施例也可以不设置通孔13,连接件10另一端直接与亲水性微通道14连通即可。
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