[发明专利]一种高纯度尿促卵泡刺激素及其制备方法

权利要求书

1.一种高纯度尿促卵泡刺激素的制备方法，依次包括如下步骤：

(a)将含有低纯度尿促卵泡刺激素的溶液1经过阳离子交换色谱纯化，得到 馏出物1；和

(b)将含有馏出物1的溶液2经过染料亲和色谱纯化，得到高纯度尿促卵泡刺 激素；

步骤(b)中得到的高纯度尿促卵泡刺激素纯度不低于95w/w％，其杂质含量 不超过5w/w％；

所述阳离子交换色谱的树脂骨架介质包括琼脂糖，葡聚糖，纤维素，苯乙 烯和二乙烯基苯的交联物，丙烯酸和/或其衍生物的交联物；

所述的阳离子交换色谱的树脂活性基团选自磺酸丙基、次甲基磺酸基、羧 基、羧甲基或苯酚基；

所述染料亲和色谱的树脂的染料配基选自Cibacron Blue、Orange、Red或 Green。

2.如权利要求1所述的制备方法，所述的步骤(a)中的阳离子交换色谱纯化 包括以下步骤：

(i)用pH4-7含有低纯度尿促卵泡刺激素的第一上样液进行上样，所述第一 上样液中低纯度尿促卵泡刺激素的浓度为0.1-10w/v％，其中w/v的单位为g/ml；

(ii)用pH4-6的第一洗涤液进行洗涤；和

(iii)用pH4-6的第一洗涤液和pH4-6的第一洗脱液进行洗脱，得到馏出物1； 步骤(b)中的染料亲和色谱纯化包括以下步骤：

(i′)用pH5-7含有馏出物1的第二上样液进行上样；所述第二上样液中馏出 物1的浓度为0.05-5w/v％，其中w/v的单位为g/ml；

(ii′)用pH6-11的第二洗涤液进行洗涤；和

(iii′)用pH6-11的第二洗脱液进行洗脱，得到高纯度尿促卵泡刺激素。

3.如权利要求1所述的制备方法，所述的阳离子交换色谱的树脂活性基团选 自磺酸丙基或次甲基磺酸基。

4.如权利要求1所述的制备方法，所述染料亲和色谱的树脂是 Blue Sepharose 6B或Blue Sepharose FF。

5.如权利要求1-3任一项所述的制备方法，所述的阳离子交换色谱的树脂是 SP Sepharose或CM Sepharose。

6.如权利要求1-3任一项所述的制备方法，所述染料亲和色谱的树脂的固相 载体选自皂土、玻璃微球、石英微球、羟磷酸钙、氧化铝、聚丙烯酰胺凝胶、 淀粉凝胶、葡聚糖凝胶、纤维素或琼脂糖。

7.如权利要求1-3任一项所述的制备方法，其特征在于，步骤(a)或(b)进行 1-3次。

8.如权利要求1-3任一项所述的制备方法，其中卵泡刺激素是人尿来源的卵 泡刺激素。