[发明专利]一种鲐鱼耳石横截面切片的制作及其年龄鉴定方法

说明书

技术领域

本发明涉及一种鲐鱼耳石横截面切片的制作及其年龄鉴定方法，具体涉及一种通过灼烧法来制作的鲐鱼耳石横截面切片及其年龄鉴定的方法，属水产学领域。

背景技术

鲐鱼是我国近海重要的经济鱼类之一，对鲐鱼生长参数的合理估算是进行鲐鱼资源科学评估的基础，并且还是对鲐鱼年龄的准确鉴定的一项极为重要的基础性工作。

鱼类自孵化初始，耳石就已经形成，之后半透明的冬轮和不透明夏轮每年都在耳石上沉积，共同组成了年轮。根据耳石上的轮纹数就可以确定鱼类的年龄。因此，如何准确地对鲐鱼耳石上的轮纹加以判读，确定其年轮数是鲐鱼年龄鉴定的关键技术问题。

鳞片、脊椎骨、耳石都曾被用来鉴定鲐鱼的年龄。鲐鱼鳞片小而薄，不易采集和保存，且冬轮和假轮极难区分，对年龄鉴定带来极大困难。虽然鲐鱼第I-V脊椎骨上的年轮比较明显，但其立体的锥形形状使得年轮在显微镜下也难以观察，而且脊椎骨的采集必须切割鱼体，因此是比较麻烦。

对耳石表面进行观察是定鲐鱼年龄最常用的方法，但鲐鱼耳石为乳白色、且半透明，冬轮和夏轮不易区分，且耳石表面分布有众多的轮纹，使得日轮、年轮和夏轮难以区分，对年龄鉴定造成极大困难，容易导致错误地判读鲐鱼的年龄。当耳石表面存在结晶体时，结晶体覆盖轮纹，无法对其进行年龄鉴定。因此，本方法通过对耳石进行灼烧，加强了冬轮和夏轮的颜色对比，并通过判读耳石横截面上的轮纹，克服了日轮和结晶体对年轮的干扰，提高了年轮到可辨识度，从而达到提高鲐鱼年龄鉴定准确度的目的。

发明内容

本发明所要解决的技术问题是提供一种鲐鱼耳石横截面切片的制作及其年龄鉴定方法，该方法可有效提高鲐鱼年龄的可辨识度和准确度。

为了达到上述目的，本发明采用以下技术方案来实现：

一种鲐鱼耳石横截面切片的制作方法，包括以下步骤：

1)浸泡：将鲐鱼耳石取出后，放入容器中，加入重量百分比浓度为70％的酒精，浸泡1周；

2)清洗耳石：将鲐鱼耳石从容器中取出，放入盛有水的培养皿中，在解剖镜下，用小毛刷将鲐鱼耳石表面残留的有机组织和杂质清洗干净；

3)画线：鲐鱼耳石清洗干净后，在解剖镜下观察，凹面朝上，找出鲐鱼耳石的核心，然后用铅笔画一条穿过鲐鱼耳石核心的标记线，在鲐鱼耳石前区部位画一条切割线；

4)切除耳石：在解剖镜下，一手用镊子将鲐鱼耳石固定，另一手用解剖刀沿切割线，将鲐鱼耳石前区部分切除；

5)灼烧：将切割后的鲐鱼耳石从培养皿中取出，放置在吸水纸上将水吸干，然后将鲐鱼耳石放置在带有凹面的载波片上，用酒精灯灼烧至褐色或深棕色；

6)树脂包埋：按1∶1.5的体积比将压克力粉和固化剂配置成溶液，将溶液倒入塑料模具，溶液覆盖模具底部即可，耳石切割面朝上并平行于模具底部，继续加入溶液，加满为止，在避光放置24小时，固化；

7)切割：将包埋有鲐鱼耳石的模具以标记线为中心，切割成0.8-1.2mm的薄片；

8)打磨：将鲐鱼耳石切片放置在磨床打磨盘上，分别用规格为P1200和P2000的防水砂纸打磨至0.3-0.7mm厚；

9)抛光：将规格为0.3μm的抛光粉配置成70～90g/L的悬浮液备用，将防水砂纸换成抛光绒布，用注射器吸入抛光粉悬浮液，均匀滴撒在绒布上，然后将切片两面抛光。

所述的鲐鱼年龄鉴定方法为，将载玻片一面用深蓝色涂料完全覆盖，晾干备用；将鲐鱼耳石切片放置于涂有深蓝色涂料的载玻片上，在CCD解剖镜下，并滴上几滴甘油，在反射光照射下，对轮纹进行判读。

本发明中所用到的压克力粉和固化剂，化学名称为甲基丙烯酸甲酯，是金相式样专用的进口树脂材料，适用于PCB、FPC、半导体技术、微电子技术、医学技术、光电技术等领域。在室温下将压克力粉和固化剂按适当比例混合，即可静态固化，生成高分子聚合物--透明树脂。其固化迅速，固化效果理想(固化时间：6min)；不会对人体造成伤害，无毒；使用安全、简便。

制作本发明的鲐鱼横截面切片及其年龄鉴定时，需要特别注意以下几点：

(1)鲐鱼耳石薄且脆，不能通过直接切割获取横截面。因此用树脂包埋，再通过切割、打磨来获得鲐鱼耳石的横截面。横截面应通过耳石核心，以保证横截面包含完整的年轮信息。

(2)灼烧时间和程度控制。鲐鱼耳石不能直接用火焰灼烧，应放置在载玻片上，用酒精灯外焰灼烧3-5秒，当鲐鱼耳石由白色变为褐色或棕红色时，立即停止灼烧。鲐鱼耳石颜色为淡黄色时，说明灼烧时间不够，可继续灼烧至褐色或棕红色。若鲐鱼耳石灼烧过度，颜色由褐色转变为黄灰色，鲐鱼耳石则完全不透明。