[发明专利]普瑞巴林及其手性异构体的分离检测方法

权利要求书

1.一种普瑞巴林及其手性异构体的分离检测方法，包括：

A)在进色谱柱前，将普瑞巴林与衍生化试剂溶解在高沸点的非质子性有机溶剂 中，于微波辅助条件下进行快速衍生化反应，所述衍生化试剂为N^α-(5-氟-2，4-二 硝基苯基)-D-氨基酸类化合物；

B)对衍生物采用非手性高效液相色谱或非手性高效液相色谱与质谱联用分离测 定；

所述N^α-(5-氟-2，4-二硝基苯基)-D-氨基酸类化合物选自：N^α-(5-氟-2，4-二硝 基苯基)-D-丙胺酰胺、N^α-(5-氟-2，4-二硝基苯基)-D-苯丙胺酰胺、N^α-(5-氟-2，4- 二硝基苯基)-D-脯胺酰胺、N^α-(5-氟-2，4-二硝基苯基)-D-缬胺酰胺；

所述测定包括以下步骤：

1)取普瑞巴林适量，用水溶解并稀释后，配制成普瑞巴林溶液；

2)取衍生化试剂适量，用二甲基亚砜或二甲基甲酰胺溶解，配制成衍生化试剂 溶液；

3)取普瑞巴林溶液、衍生化试剂溶液和三乙胺溶液各适量，混合后密封成混合 溶液，该溶液含普瑞巴林与衍生化试剂的摩尔比为1∶1～1∶100；

4)上述混合溶液在微波辅助的条件下进行衍生化反应1～5min，反应完毕，加入 醋酸溶液，混匀，作为供试品溶液；

5)用非手性高效液相色谱或非手性高效液相色谱与质谱联用分离测定步骤4)所 得的供试品溶液。

2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于所述高沸点的非质子性有机溶剂为二甲 基亚砜或二甲基甲酰胺。

3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：所述步骤4)在微波辅助条件下进行衍 生化反应2～4min。

4.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：所述步骤3)的混合溶液含普瑞巴林与 衍生化试剂的摩尔比为1∶1～1∶5。

5.根据权利要求1所述的方法，其特征在于所述非手性高效液相色谱或非手性高效 液相与质谱联用所使用的色谱柱是以十八烷基硅烷键合硅胶为填料的色谱柱或以辛 基硅烷键合硅胶为填料的色谱柱。

6.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：所述高效液相色谱法的检测波长为 200～380nm。

7.根据权利要求1-6所述的任一方法，其特征在于所述的高效液相色谱法或高效液 相与质谱联用使用的流动相为甲酸铵水溶液-乙腈体系，所述甲酸铵水溶液的pH值 为2.0～7.0。

8.根据权利要求7所述的方法，其特征在于：所述甲酸铵水溶液与乙腈的比例为 3∶7～7∶3。

9.根据权利要求7所述的方法，其特征在于：所述甲酸铵水溶液的pH值使用甲酸、 乙酸或氨水调节。

10.根据权利要求7所述的方法，其特征在于：所述的甲酸铵水溶液浓度为0.1mol/L。