[发明专利]一种用于预测慢性阻塞性肺病的试剂盒

说明书

技术领域

本发明涉及一种用于预测慢性阻塞性肺病的试剂盒，属于生物技术领域。

背景技术

血清中蛋白质测定用于慢性阻塞性肺病诊断，已有近十年历史(用血清淀粉样蛋白A和C反应蛋白联合诊断慢性阻塞性肺病的急性发作期)。用血清淀粉样蛋白A和C反应蛋白采用酶联免疫检测诊断慢性阻塞性肺病急性发作，十分方便，但是不灵敏，和没有特异性，存在着无法克服的缺点。肺功能检查对确定气流受限有重要意义，但是肺功能比较滞后和不能总体反映慢性阻塞性肺病的状态和病程，已成为改进对慢性阻塞性肺病的诊断、预防和治疗措施的瓶颈。

系统性改变在慢性阻塞性肺病发生及进展中的作用成为该领域研究的热点。许多研究也显示肺外的脏器功能失衡与慢性阻塞性肺病进展相关，迄今已发现多种基因表达可以作为慢性气道疾病预测指标。然而，慢性阻塞性肺病方面目前临床尚没有预测慢性阻塞性肺病的试剂盒来预测该病的进展及生存情况。

发明内容

本发明所要解决的技术问题在于：改变肺功能研究比较滞后和不能总体反映慢性阻塞性肺病的状态和病程的状况，研制一种用于预测慢性阻塞性肺病的试剂盒。

为了达到上述目的，本发明通过多聚酶链反应检测慢性阻塞性肺病血清蛋白的表达，发现Wnt抑制因子1、肿瘤坏死因子β、巨噬细胞炎性蛋白3α、肿瘤坏死因子(配体)超家族成员10、血管内皮生长因子D受体、嗜伊红粒细胞趋化蛋白3/趋化因子配体26、糖皮质激素诱导的TNF受体家族相关蛋白18，特别这7种细胞因子的联合作为一种可预测慢性阻塞性肺病病人的生物标记物，可以成为早期发现慢性阻塞性肺病的筛查试剂，用于发展成包含该细胞因子联合的诊断试剂盒。

如图1所示，为慢性阻塞性肺病疾病预测的质心图，其中，向右的线代表的是上调，向左的代表的下调，线长代表上下调倍数比较大。慢性阻塞性肺病的预测蛋白名称如下表所示：

本发明的技术方案是提供一种用于预测慢性阻塞性肺病的试剂盒，由细胞因子及其酶标抗体、pH9.6碳酸盐缓冲液、pH7.4磷酸盐缓冲液、血清蛋白稀释液、终止液、四甲基联苯胺底物溶液、正常人血清和阳性对照血清组成，其特征在于：所述细胞因子为Wnt抑制因子1、肿瘤坏死因子β、巨噬细胞炎性蛋白3α、肿瘤坏死因子超家族成员10、血管内皮生长因子D受体、嗜伊红粒细胞趋化蛋白3和趋化因子配体26和糖皮质激素诱导的TNF受体家族相关蛋白。

进一步地，所述的pH9.6碳酸盐缓冲液为将1.59克碳酸钠和2.93克碳酸氢钠加到1000ml蒸馏水中得到。

所述的pH7.4磷酸盐缓冲液为将0.2克磷酸二氢钾、2.9克十二水合磷酸氢二钠、8.0克氯化钠、0.2克氯化钾和0.5ml吐温-20加到1000ml蒸馏水中得到。

所述的血清蛋白稀释液为将0.1克牛血清、羊血清或兔血清白蛋白加到100ml pH7.4磷酸盐缓冲液中得到。

所述终止液为2M硫酸溶液。

所述四甲基联苯胺底物溶液为将0.5ml 10mg/5ml的四甲基联苯胺的无水乙醇溶液、10ml pH5.0底物缓冲液与32μl 0.75vol％过氧化氢水溶液混合得到，其中，所述的PH5.0底物缓冲液为含有0.2M磷酸氢二钠和0.1M柠檬酸的蒸馏水溶液。

由上述研究得出本发明主要特点：

1.本发明首次提出Wnt抑制因子1、肿瘤坏死因子β、巨噬细胞炎性蛋白3α、肿瘤坏死因子超家族成员10、血管内皮生长因子D受体、嗜伊红粒细胞趋化蛋白3和趋化因子配体26、糖皮质激素诱导的TNF受体家族相关蛋白18或与其它临床指标组合可成为慢性阻塞性肺病诊断的主要指标。

2.Wnt抑制因子1、肿瘤坏死因子β、巨噬细胞炎性蛋白3α、肿瘤坏死因子(配体)超家族成员10、血管内皮生长因子D受体、嗜伊红粒细胞趋化蛋白3/趋化因子配体26、糖皮质激素诱导的TNF受体家族相关蛋白18作为预测指标明显优于目前用于预测慢性阻塞性肺病患者的肺功能临床指标，而且测定此蛋白表达水平简单易行可靠。

附图说明

图1为慢性阻塞性肺病疾病预测的质心图。

具体实施方式

下面结合具体实施例来说明本发明。

实施例1

一种用于预测慢性阻塞性肺病的试剂盒，由细胞因子及其酶标抗体、pH9.6碳酸盐缓冲液、pH7.4磷酸盐缓冲液、血清蛋白稀释液、终止液、四甲基联苯胺底物溶液、正常人血清和阳性对照血清组成。