[发明专利]一种生物催化转化松果菊苷生产毛蕊花糖苷单体化合物的方法

权利要求书

1.一种利用生物催化转化生产毛蕊花糖苷单体化合物的方法，以肉苁蓉提取物作为催化反应底物，采用通常固定化酶工业生产中的吸附法固定方式，获得β-葡萄糖苷酶工业酶制剂固定化酶作为生物催化剂，催化水解底物中的松果菊苷定向转化为毛蕊花糖苷单体化合物；将反应液通过通常的分离提纯及浓缩、干燥工艺，获得毛蕊花糖苷单体化合物；所述的肉苁蓉提取物是以肉苁蓉肉质茎，经通常提取分离工艺获取的肉从蓉提取物，其苯乙醇苷类化合物含量不低于3.2％；催化反应过程初始底物浓度为0.1％～30％；温度为38℃～60℃；pH为4.0～5.8；时间为3.5h～10h；催化反应过程反应物中的β-葡萄糖苷酶活力为1U/g～1000U/g。

2.按照权利要求1所述的方法，其特征是该方法的具体步骤包括：

(1)、采用肉苁蓉提取物作为催化反应底物，利用通常固定化酶工业生产中的吸附法固定方式，获得β-葡萄糖苷酶工业酶制剂固定化酶作为生物催化剂，经通常工业固定化酶反应器进行催化反应，催化水解去掉底物中松果菊苷葡萄糖基配体末端的一个葡萄糖基、定向转化为毛蕊花糖苷单体化合物；催化反应过程初始底物浓度为0.1％～30％，温度为38℃～60℃，pH为4.0～5.8，时间为3.5h～10h，催化反应过程反应物中的β-葡萄糖苷酶活力为1U/g～1000U/g；

(2)、采用通常工业膜分离工艺装置超滤膜或陶瓷膜，选择性筛分及截留除去经步骤(1)反应后的反应液中的多糖、蛋白质大分子杂质以及微粒和亚微粒杂质，或再通过纳滤膜，进一步选择性筛分及截留除去氨基酸、D-甘露醇、甜菜碱小分子杂质；获得毛蕊花糖苷成分提取液；

(3)、将步骤(2)获得的毛蕊花糖苷成分提取液，通过通常工业真空浓缩工艺或工业薄膜蒸发浓缩工艺，获得固形物含量为30％～56％的浓缩物；再通过工业喷雾干燥工艺，或通常的其它工业干燥方法，获得毛蕊花糖苷单体化合物的粉状物或干燥物。

3.按照权利要求1或2所述的方法，其特征是催化反应过程初始底物浓度为1％～15％；温度为42℃～50℃；pH为4.5～5.3；时间为4h～6h；催化反应过程反应物中的β-葡萄糖苷酶活力为10U/g～100U/g。

4.按照权利要求1或2所述的方法，其特征是催化反应过程中再添加K⁺、Na⁺、Mn²⁺或Co²⁺作为催化反应的激活剂，添加的激活剂在初始反应物中的浓度为0.1mol/L～3mol/L。

5.按照权利要求4所述的方法，其特征是添加的K⁺、Na⁺、Mn²⁺或Co²⁺激活剂在初始底物中浓度为0.5mol/L～1.5mol/L。

6.按照权利要求2所述的方法，其特征是在步骤(2)中再采用通常工业大孔树脂吸附分离工艺，或/和通常工业层析柱分离纯化工艺，或/和通常模拟移动床色谱分离系统工艺或通常多功能色谱分离工艺，进一步分离纯化。

7.按照权利要求2所述的方法，其特征是步骤(2)中所述的超滤膜或陶瓷膜的相对分子质量为1000～4500；纳滤膜相对分子质量为200～300。

8.按照权利要求1或2所述的方法，其特征是所述的β-葡萄糖苷酶工业酶制剂包括β-葡萄糖苷酶、纤维素酶、植物提取复合酶或/和植物水解复合酶。

9.按照权利要求2所述的方法，其特征是步骤(3)中所述的工业真空浓缩工艺或工业薄膜蒸发浓缩工艺的温度为42℃～80℃，工业喷雾干燥工艺的干燥塔进风温度为125℃～285℃，其它工业干燥的方法干燥温度为50～100℃。

10.按照权利要求2所述的方法，其特征是步骤(3)中所述的工业真空浓缩工艺或工业薄膜蒸发浓缩工艺的温度为45℃～65℃，工业喷雾干燥工艺的干燥塔进风温度为135℃～185℃，其它工业干燥的方法干燥温度为60～80℃。