[发明专利]一种低浓度挥发性混合有机废气生物净化菌种的培育方法

说明书

技术领域

本发明属生物菌种培育技术领域，具体涉及一种低浓度挥发性混合有机废气生物净化菌种的培育方法。

背景技术

大气污染是目前最突出的环境问题之一。挥发性有机化合物的工业废气是除粉尘之外排放范围最广泛、种类最多的大气污染物。生物法净化低浓度工业废气是一种工业废气净化的新方法，广泛的研究与应用仅有约20年的历史。该法是一种用微生物对污染物有较强、较快的适应能力的特点，对其进行驯化，使微生物能够以目标污染物为碳源和能源，将污染物转化为无害的、简单的物质(如二氧化碳、水等)。废气生物净化系统中微生物对于单一物质的降解比较容易，微生物经驯化容易适应单一物质的降解，而对于混合废气因含有较多复合物质的降解则需要多种微生物参与。但是多种微生物之间的生长平衡却较难控制，所以容易造成只有单一某种微生物生长占优势。因此，对于多种混合在一起的有机化合物工业废气的生物净化系统的净化能力较弱。

发明内容

本发明的目的是提供一种低浓度挥发性混合有机废气生物净化菌种的培育方法，使多种微生物之间平衡生长，培育能同时高效降解多种目标组分的复合生物菌种。

该低浓度挥发性混合有机废气生物净化菌种的培育操作在常温常压下进行，采用好氧振荡瓶培养法。其包括以下步骤：

1)培育菌种一；

2)菌种一与菌种二混合接种，并用自来水调配混合菌种的污泥浓度；

3)以废气中混合有机物为底物，投配入接种物培养基中，对接种物培养驯化；

其中，该菌种一取自印染污水处理厂的活性污泥经培养驯化后所得，为黄杆菌属及蜡状芽孢杆菌属的混合菌种；该菌种二为取自石化污水处理厂的二沉池中采集活性污泥，其为包括黄杆菌属、蜡状芽孢杆菌属、木糖氧化无色杆菌和施氏假单胞菌的混合菌种。

该菌种二与菌种一混合接种的体积比为20∶1。

进一步，培育菌种一包括如下步骤：

a)制备菌种一的液体培养基：取磷酸盐缓冲液，MgSO₄溶液，CaCl₂溶液，FeCl₃溶液及微量元素溶液混合，加入蒸馏水稀释，并调整pH值，经高压蒸汽灭菌，无菌分装后，加入液体二甲苯和柴油作为唯一碳源和能源，密封保存；

b)驯化：将取自印染污水处理厂的活性污泥混合液充分曝气活化，接着用超声振荡器处理使污泥絮体分散均匀，取处理好的污泥混合液加入筛选驯化培养基中，采用摇床试验对微生物进行好氧振荡培养；

c)将筛选的菌株接种于活化富集培养基中，好氧振荡后，置于高速离心机中离心，然后用磷酸盐缓冲液清洗、离心，将离心所得的菌体制成菌种悬浮液，即得菌种一。

进一步，所述菌种一的液体培养基的成分为：磷酸盐缓冲液：K₂HPO₄·H₂O 20～25g/L，KH₂PO₄6～9g/L，Na₂HPO₄·12H₂O 30～35g/L，NH₄Cl 3～6g/L；MgSO₄溶液：MgSO₄20～25g/L；CaCl₂溶液：CaCl₂35～40g/L；FeCl₃溶液：FeCl₃0.1～0.3g/L；微量元素溶液：MnSO₄·H₂O35～40mg/L，ZnSO₄·H₂O 40～45mg/L，(NH₄)₆Mn₇O₂₄·4H₂O 30～35mg/L。

进一步，所述培育菌种一的活化富集培养基成分为牛肉膏5.0g，蛋白胨10g，NaCl 5g，水1000mL，并将其高压灭菌。

进一步，对所述菌种一和菌种二的接种物驯化的接种物培养基的成分为：水解淀粉0.0～1.0g/L，尿素0.5～1g/L，KH₂PO₄0.2～0.3g/L，Na₂HPO₄0.2～0.3g/L，MgSO₄·7H₂00.1～0.2g/L，CaCl₂0.02～0.03g/L，维生素B₁0.05～0.15g/L。