[发明专利]一种芽孢杆菌调控浮游微藻混合培养的方法

说明书

技术领域

本发明涉及一种浮游微藻的培养方法，具体涉及一种芽孢杆菌调控浮游微藻混合培养的方法。

背景技术

水体环境中微藻群落结构的稳定不仅与微藻的生物量有关，还与其群落多样性指数密切相关，目前对微藻调控或对于浮游微藻的人工定向培养，多针对单种或两种优良微藻开展，在复杂的水体环境中，容易导致某一阶段个别微藻种类过度繁殖，水体中的微藻群落多样性指数相对偏低，不利于水环境中微藻群落的稳定，从而造成中前期藻相难培育、中期易突变、后期过旺盛的情况。

经调查在对虾养殖池中微绿球藻、隐藻和绿色颤藻均为优势微藻，其中前两者多被认为是优良微藻，可有效调控和优化水体环境，颤藻作为蓝藻则多被认为是水产养殖业的有害微藻。其实绿色颤藻在各种水产养殖模式中多为常见种，即使在优良的水体环境和微藻群落结构中亦多有存在，在多种微藻共存生长情况下存在一定数量的绿色颤藻，可维持水体中微藻种类和生态功能的平衡，但关键必须将数量严格控制在一定的水平，以避免优势度水平过大，妨碍甚至抑制其他优良微藻的生长。

水体环境中的微生物与微藻间具有极其密切的联系。某些细菌能够不断的向细胞外分泌一些有机物质，如胞外糖肽类物质，有的细菌还可以分泌类维生素物质，促进某些微藻生长；也有的细菌分泌能溶解藻细胞的酶物质或其他活性物质，使某些种类的微藻生长受到抑制。基于细菌与藻类间所具有的特异性，可从特定的环境中筛选有关菌种，并以之调控多种微藻的共同生长体系，使系统中不同种类微藻以较优比例和数量进行生长。地衣芽孢杆菌作为微生态制剂均具有较强的产胞外酶活性，能促进水环境中的物质和能量循环，并且还能产生多种抗菌物质，抑制病源菌的生长。由于具有无毒、无副作用、无污染、无残留等特点，它被认为是安全有效的有益微生物，并已广泛应用与农业、医药、食品、饲料加工等行业。

因此，在进行调控水产养殖应用微藻初期培养时，根据不同种类微藻的生态特性、细菌与藻类间所具有的特异性关系，从菌藻协同调控的基础出发，在微藻混合培养系统中引入有益微生物，提高微藻总体数量，稳定不同微藻数量比例，从而为在中小型对虾养殖系统中引入高效稳定的多藻种藻液，促进和优化生产初期水环境中的微藻结构，而目前关于此的研究正是急需要解决的问题。

发明内容

本发明的目的在于提供一种芽孢杆菌调控浮游微藻混合培养的方法，该方法使各微藻在混合培养中生长均衡，稳定性好，避免混合培养体系中藻相的生物多样性单一，避免某种微藻的数量出现极端优势或劣势。

本发明提供的芽孢杆菌调控浮游微藻混合培养的方法，选取优势度大于0.15的微藻置于氮浓度为12～16mg/L、磷浓度为2～6mg/L、铁浓度为0.10～0.20mg/L的培养液中进行混合培养，在混合培养过程中采用地衣芽孢杆菌进行调控，培养条件为：温度26～28℃，盐度12～18‰，pH7.5～8.0，光照强度4000～5000Lx，光暗比12h∶12h～14h∶10h。

在培养液中：

氮源为硝酸铵、氯化铵、硫酸铵、硝酸钠、硝酸钾或尿素中的一种或几种。

磷源为磷酸二氢钾、磷酸二氢钠或过磷酸钙中的一种或几种。

铁源为柠檬酸铁。

所述的微藻为微绿球藻、隐藻和绿色颤藻的混合。

所述的微绿球藻、隐藻和绿色颤藻的投放比例为0.7～1.3∶0.7～1.3∶0.7～1.3，各微藻的初始投放密度为104～10⁵cells/mL。

所述的芽孢杆菌的初始投放密度为10⁴～10⁵CFU/mL。

在养殖水体水色为鲜绿色、豆绿色或绿褐色，养殖水体浮游微藻生物多样性指数大于1.60的养殖池中，筛选优出势度大于0.15的微藻种类进行混合培养。

本发明的有益效果是：

(1)筛选出了多种优势微藻进行混合培养，确保了微藻藻相的多样性，并通过地衣芽孢杆菌在培养系统中的添加，直接或间接地调控了各种微藻的数量比例，使微藻达到了均衡生长的效果；

(2)在芽孢杆菌和各种微藻细胞增长的相关性方面采用了相关分析法，并采用了通径分析法评价芽孢杆菌对各种微藻的影响，通过实际验证，得出了藻相稳定性培养的相关调控措施，保证了各种微藻生长的稳定性；