[发明专利]一种甲硝唑的快速检测方法、检测试剂盒和在检测化妆品、消毒剂中添加甲硝唑上的应用

说明书

技术领域

本发明涉及甲硝唑的检测方法，具体涉及一种甲硝唑的快速检测方法、检测试剂盒和在检测化妆品、消毒剂中添加甲硝唑上的应用。

背景技术

甲硝唑(英文名称为Metronidazole，MNZ)，商品名为灭滴灵、甲硝哒唑、甲硝基羟乙唑、灭滴唑。甲硝唑的化学名称为2-甲基-5-硝基咪唑-1-乙醇，分子式为C₆H₉N₃O₃。它是一种硝基咪唑类药物，其硝基在无氧环境中还原成氨基而显示广谱抗厌氧菌和抗原虫的作用，临床主要用于预防和治疗厌氧菌引起的感染，如呼吸道、消化道、腹腔及盆脓感染，皮肤软组织、骨和骨关节等部位的感染以及脆弱拟杆菌引起的心内膜炎、败血症及脑膜炎等，同时还广泛应用于预防和治疗口腔厌氧菌感染。此外，甲硝唑对疥螨有较好的杀灭作用，可治疗疥疮，可杀灭引起炎症性痤疮的棒状杆菌，故对痤疮有效。

当前许多除痘、祛螨类化妆品、用于阴道炎等妇科炎症的消毒剂、动物性食品以及口腔类医药用品中均违法添加有甲硝唑，虽然甲硝唑具有抗菌消炎的作用，但是长期使用会引起皮肤糜烂、瘙痒等，还可能引起过敏性休克、哮喘等呼吸系统症、泌尿道的不良反应、白细胞和血小板减少、疱疹性皮炎、孕妇早产、癫痫发作和抑郁症等，严重时可危及患者的生命，此外甲硝唑还会导致对抗生素的耐药性，造成健康隐患。

目前我国《化妆品卫生规范2002年版》制定的化学指标分析方法只有22个标准仅涉及57项，很多添加到化妆品的物质由于缺乏系统的成分、毒性、功效检测方法及评价要求，使得目前化妆品的卫生质量仅仅是现行标准规定的“合格”，不能有效反映化妆品的真实卫生质量，特别是化妆品中药物非法添加正受到越来越多的关注。我国《化妆品卫生规范》、欧盟化妆品规程规定甲硝唑、氯霉素、林可霉素等抗生素类物质禁止在化妆品中使用。

北京市疾病预防控制中心环境卫生所对在北京、江苏、江西地区销售的122件祛痘除螨类化妆品进行了检测，122件样品检出甲硝唑14件，超标率11.5％，最大添加量达到3.9％，其中广东28件中检出甲硝唑5件，超标率达17.9％。

目前对于违法添加甲硝唑的检测，主要是采用高效液相色谱、液相色谱质谱联用、薄层层析等方法。高效液相色谱法是常用的现代分析方法，它具有色谱分离效率高、灵敏度高等优点，在相同的色谱条件下，甲硝唑对照品溶液和样品提取所得的供试品溶液分别进样，根据色谱保留时间可判断待测样品是否含有甲硝唑。

市面上出售的一种硝基咪唑类检测试剂盒，是采用间接竞争ELISA方法，在酶标板微孔条上预包被偶联抗原，样本中残留的甲硝唑和微孔条上预包被的偶联抗原竞争抗甲硝唑抗体，加入酶标二抗后，用TMB底物显色，样本吸光值与其残留物甲硝唑的含量成负相关，与标准曲线比较再乘以其对应的稀释倍数，即可得出样品中甲硝唑的含量。

边疆、杨立延等人【边疆.杨立延.陈奕桦.王艳秋，双波长线性回归测定醋酸氯己定和甲硝唑.中华预防医学杂质.2000(34)1：54-55】采用双波长线性回归法测定复方消毒剂中的甲硝唑，通过建立标准曲线以及分光光度计测量，得到甲硝唑的含量。

上述的色谱法、ELISA方法和双波长线性回归法等，虽然都能检测出化妆品或消毒剂中的甲硝唑，但是这些方法都存在操作复杂、样品处理时间长、对于大批量待检测样品无法做到快速筛查，检测工作量大等问题，此外色谱法还存在仪器价格昂贵，色谱柱易受污染、分析成本高和不适合做流动性大的现场检测等问题。

发明内容

本发明的目的在于针对现有技术的不足，提供一种不需贵重分析仪器、分析成本低、对甲硝唑检测的专属性强、灵敏度高且试验现象明显、检验结果正确率高、适用于现场快速检测样品中是否违法添加有甲硝唑的快速检测方法。

本发明的另一个目的在于提供一种利用上述方法检测甲硝唑的检测试剂盒。

本发明的另一个目的在于提供上述快速检测方法在检测化妆品、消毒剂中是否添加有甲硝唑上的应用。

本发明的上述目的是通过如下方案予以实现的：

一种甲硝唑的快速检测方法，该方法是利用甲硝唑的如下两个性质对其实现快速检测：

(1)甲硝唑在不同溶剂中的溶解性是有差异的，它可溶于酸，但在石油醚、乙醚等有机溶剂中是极微弱溶解的；

(2)芳香族硝基化合物易于被还原，因此当甲硝唑被碱还原后会生成桔红色的偶氮苯和无色的氢化偶氮苯。