[发明专利]单胺氧化酶诊断试剂(盒)及单胺氧化酶活性浓度测定方法

权利要求书

1.一种利用间接酶循环扩增法、酶比色法及酶联法技术的单胺氧化酶活性浓度测定方法，其方法如下：

胺类化合物+水+氧  单胺氧化酶  相应醛类产物+氨+过氧化氢

氨+2 水+6 高铁细胞色素c  亚硝酸还原酶/Ca²⁺  亚硝酸+

                                       6 亚铁细胞色素c

亚硝酸+3 还原型辅酶  亚硝酸还原酶  氢氧化铵+3辅酶+水

将最终反应物置于紫外/可见光分析仪或半、全自动生化分析仪下，检测主波长340nm吸光度下降的速度，测算出单胺氧化酶的活性浓度大小结果。

2.一种单胺氧化酶诊断/测定试剂(盒)，主要成分包括：

缓冲液                      20——500mmol/L

稳定剂                      1——4000mmol/L

还原型辅酶                  0.1——0.35mmol/L

亚硝酸还原酶(EC 1.7.2.2)    1000——80000U/L

亚硝酸还原酶(EC 1.7.1.4)    1000——80000U/L

胺类化合物                  1——50mmol/L

高铁细胞色素C               1——50mmol/L

氯化钙                      1——50mmol/L

本发明测定单胺氧化酶活性的诊断试剂盒的成分当中，所述“胺类化合物”优选以下物质之一：苄胺、对苯甲胺-β-偶氮萘酚、丁基胺、戊基胺、β-苯乙基胺、酪胺、5-羟色胺或者这七种物质的衍生物，但选择范围不受这些列举所限制。钙离子是亚硝酸还原酶(EC 1.7.2.2)的激活剂，氯化钙可以用其他钙盐取代。

试剂成分的浓度不一定只限于上述范围；在此范围内效果较好，在此范围外，试剂仍会反应作用。

其特征在于：试剂(盒)可以是干粉状态，在使用前加水溶解后使用；也可以配制成液体试剂，直接使用。

3.根据权利要求2所述单胺氧化酶诊断/测定试剂(盒)，其特征在于：

由缓冲液、稳定剂、还原型辅酶、亚硝酸还原酶(EC 1.7.2.2)、亚硝酸还原酶(EC 1.7.1.4)、胺类化合物、高铁细胞色素C、氯化钙组成单剂试剂。

4.根据权利要求2所述单胺氧化酶诊断/测定试剂(盒)，其特征在于：

由缓冲液、稳定剂、还原型辅酶、亚硝酸还原酶(EC 1.7.2.2)、亚硝酸还原酶(EC 1.7.1.4)、胺类化合物、高铁细胞色素C、氯化钙组成双剂试剂；试剂1，由缓冲液、稳定剂、还原型辅酶、胺类化合物、高铁细胞色素C、氯化钙组成；试剂2，由缓冲液、稳定剂、亚硝酸还原酶(EC 1.7.2.2)、亚硝酸还原酶(EC 1.7.1.4)组成。还原型辅酶、亚硝酸还原酶(EC 1.7.2.2)、亚硝酸还原酶(EC 1.7.1.4)、胺类化合物、高铁细胞色素C、氯化钙在试剂1或试剂2中的位置可以不限。

5.根据权利要求2所述单胺氧化酶诊断/测定试剂(盒)，其特征在于：

由缓冲液、稳定剂、还原型辅酶、亚硝酸还原酶(EC 1.7.2.2)、亚硝酸还原酶(EC 1.7.1.4)、胺类化合物、高铁细胞色素C、氯化钙组成多剂试剂；试剂1，由缓冲液、稳定剂、还原型辅酶、胺类化合物、高铁细胞色素C、氯化钙组成；试剂2，由缓冲液、稳定剂、亚硝酸还原酶(EC 1.7.1.4)组成；试剂3，由缓冲液、稳定剂、亚硝酸还原酶(EC 1.7.2.2)组成。还原型辅酶、亚硝酸还原酶(EC 1.7.2.2)、亚硝酸还原酶(EC 1.7.1.4)、胺类化合物、高铁细胞色素C、氯化钙在试剂1、试剂2或试剂3中的位置可以不限。

6.根据权利要求2所述单胺氧化酶诊断/测定试剂(盒)，其特征在于：还包括稳定剂1-4000mmol/L或0.1％-100％体积比。所述稳定剂为：甘油(Glycerol)、丙二醇(Propylene Glycol)、乙二醇(Ethylene glycol)及防腐剂中的至少一种。