[发明专利]植源性荧光色素的提取方法

说明书

技术领域

本发明涉及一种植物色素的提取方法，特别涉及一种植物花瓣中荧光色素 的提取方法。

背景技术

植源性荧光色素是指植物体中的杂多环化合物或黄酮醇类化合物，经紫外 线照射后能发出荧光的物质，它不同于化学合成的荧光染料或颜料，属植物次 生代谢的有机物质，对人体无毒、无辐射。根据这些有机物质的发光特性可将 荧光分为自发荧光和诱发荧光两种，前者如叶绿素等杂多环经紫外线照射后发 出红色荧光；另一种如花色素等黄酮醇类的发射荧光基团经紫外线照射后发出 蓝、黄色荧光。很多观赏植物的花瓣中除了含有一些不同颜色的花色素(花青 素、类胡萝卜素、甜菜碱等)外，还含有一些如黄酮醇类的花色素前驱物，它 们在可见光下大多为无色或淡黄色，但在紫外光下会产生可见的荧光。

目前，从植物中高产率、高纯度提取荧光物质的技术未有报道。

发明内容

本发明的目的在于提供一种从观赏植物的花瓣中高产率、高纯度提取荧光 色素的方法。

实现上述发明目的的技术方案是提供一种植源性荧光色素的提取方法，其 步骤如下：

(1)将植物的鲜花或干花花瓣置于质量浓度10％的甲酸溶液中浸提12～16 小时后，对得到的溶液进行过滤处理；

(2)将得到的上述滤液用蒸馏水稀释，稀释液用大孔吸附树脂柱进行过滤 处理；

(3)用蒸馏水洗柱后，再用洗脱液1洗脱柱中的色素；

(4)收集大孔吸附树脂柱处理后的色素液，在35±2℃的水温条件下减压浓 缩处理，得到浓缩色素液；

(5)将上述浓缩色素液用质量浓度为10％的甲酸溶液溶解后，用小孔葡聚 糖凝胶柱进行过滤处理，再用洗脱液2洗脱柱中的色素；

(6)在紫外光下观查小孔葡聚糖凝胶柱中色素的移动情况，待具有荧光效 应的色素移于柱体的出口处时，收集洗出液，得到植源性荧光色素。

上述技术方案中，洗脱液1的组成为按体积比，甲酸∶乙醇＝5∶95；洗 脱液2的组成为按体积比，甲酸∶乙醇∶蒸馏水＝5∶50∶45。

大孔吸附树脂为DiaionHP-20；小孔葡聚糖凝胶为SephadexLH-20。

目前，国内外荧光色素的产品种类较少，它们大多来自于化学合成且对人 体有害，本发明利用葡聚糖凝胶分子筛和过滤的特性，采用柱层析技术分离花 瓣中的具有荧光性质的黄酮醇类物质，从植物中高产率、高纯度提取天然荧光 物质，为开发荧光食品添加剂提供新型材料，以及对隐形、防伪标记的印刷等 具有很高的应用价值。

具体实施方式

下面结合实施例对本发明作进一步描述：

实施例1：

本实施例技术方案适用于以杜鹃花的花瓣为原料，从中提取天然荧光色素， 其具体步骤如下：

(1)称取100g杜鹃花的干花瓣置3L的烧杯中，加入质量浓度为10％的甲 酸溶液1000mL，置4～7℃低温下浸提12小时后；把浸提液用1号滤纸过滤， 滤渣再加入10％的甲酸1000mL，在室温浸提4～6小时后用1号滤纸过滤。

(2)合并两次的滤液，并用2000mL的蒸馏水稀释，4000mL的稀释液加入 大孔吸附树脂HP-20柱中，柱体积为Φ5cm×40cm；

(3)用8000mL的蒸馏水洗柱后，再用1500mL洗脱液1(甲酸∶乙醇的体 积比为5∶95)洗脱柱中的花色素；

(4)收集大孔吸附树脂柱处理后的花色素液，用旋转浓缩仪在35±2℃的水 温条件下减压浓缩色素液，浓缩产物用质量浓度为10％的甲酸100mL溶解；

(5)溶解后的色素液用小孔葡聚糖凝胶LH-20柱(体积为Φ5cm×40cm)过 滤，用过量洗脱液2(甲酸∶乙醇∶蒸馏水体积比为5∶50∶45)洗脱柱中的花 色素，红色区段多为花青素成分，可弃去。而荧光色素分布于黄褐色区段，且 迟于花青素流出；

(6)用手携式紫外灯观查黄褐色区段中荧光色素的移动距离，待具有荧光 效应的色素移于小孔葡聚糖凝胶柱的出口处时收集洗出液，该洗出液即为植源 性荧光色素，在可见光下为无色，在紫外光下激发出淡绿色荧光。洗出液减压 浓缩后在可见光下为淡黄色，但在紫外光下有明显的荧光猝灭现象。