[发明专利]利用组培技术筛选克服作物连作障碍有益细菌的方法

权利要求书

1.一种利用组培技术筛选克服作物连作障碍有益细菌的方法，其特征在于，步骤如下：

1)建立目标作物的组织培养体系，得到无性繁殖的试管苗；

2)从目标作物适宜种植的土壤中或目标作物体表分离得到不同的细菌菌株；

3)制备作物提取物：所述作物提取物是指目标作物整体或任何部位的任何溶剂所提取的溶液或其干燥物；

4)在目标作物的组织培养体系中接种步骤2)中得到的不同细菌菌株，观察、评价各菌株对试管苗生长发育的影响；

5)在目标作物的组织培养体系中添加作物提取物，培养一段时间后，接种步骤2)中得到的不同细菌菌株，观察、评价试管苗生长发育情况；

6)在目标作物的组织培养体系的培养基中添加根际土壤常见有机酸，并接种步骤2)中得到的不同细菌菌株，定期测定培养基中有机酸的含量；

7)综合分析，满足以下三个条件之一的菌株即可认为是有益细菌菌株：

a步骤4)中能促进试管苗生长的菌株；

b步骤5)中能促进试管苗生长的菌株；或因添加作物提取物而使试管苗难以生长，接种后能使试管苗恢复生长的菌株；

c步骤6)中能使有机酸含量显著下降的菌株；

确定有益细菌菌株后，采用常规细菌发酵技术生产有益菌制剂，用于大田预防和治理作物的连作障碍；

以上步骤并无严格顺序限制，可自由调整，上述1)～7)仅为方便描述，并非顺序上的限制。

2.根据权利要求1所述的利用组培技术筛选克服作物连作障碍有益细菌的方法，其特征在于：所述步骤3)中，作物提取物为作物全株、根、茎或叶的水或有机溶剂提取液。

3.根据权利要求1所述的利用组培技术筛选克服作物连作障碍有益细菌的方法，其特征在于：所述步骤6)中，根际土壤常见有机酸包括对羟基苯甲酸、香草酸、咖啡酸、丁香酸、香豆酸以及苯甲酸等。

4.根据权利要求1所述的利用组培技术筛选克服作物连作障碍有益细菌的方法，其特征在于：所述步骤7)中，综合评价时，评价的指标包括作物试管苗的高度、颜色、重量及有效成分含量。