[发明专利]一种利用猪小肠提取肝素钠粗品的方法

说明书

技术领域

本发明涉及一种肝素钠的提取方法，特别涉及一种利用猪小肠提取肝素钠粗品的方法。

背景技术

目前，从猪小肠中提取肝素钠主要有盐解法和酶解法。其中酶解法收率较高，平均1800根猪小肠出1公斤肝素钠粗品(效价为100)，但工艺较复杂，废液多，对环境造成污染。而盐解法虽然工艺简单，废液较少，对环境污染小，但其收率较低，平均2300根猪小肠出1公斤肝素钠粗品(效价为100)。

发明内容

本发明的目的在于提供一种利用盐解法从猪小肠中提取肝素钠粗品的方法，在工艺简单，废液少的基础上，提高肝素钠的收率。

本发明是通过以下措施来实现的：

本发明公开了一种利用猪小肠提取肝素钠粗品的方法，采用以下步聚：

(1)盐解提取：取新鲜肠粘膜水50公斤，固体含量为4--6％重量，加盐3-5公斤，倒入反应锅内，加碱调至PH8-9；肠粘膜水用超声波处理2-4小时，超声波频率为20KHz～50KHz，功率为20-50KW；

(2)超声波处理后的肠粘膜水升温至60度，保温2小时；然后在40分钟内继续升温至95度，恒温10分钟后出料，捞去上部废液，用90--120目尼龙网布过滤；

(3)滤渣按步骤(1)进行第二次提取，合并两次滤液；

(4)将预处理好的D254强碱性阴离子交换树脂2.5公斤，投入滤液中，搅拌吸附6小时，提取树脂，弃去滤液，将收集的树脂在清水中洗至中性；

(5)用相当于树脂重量1.2倍的7％稀盐水搅拌洗涤2次，每次1小时，弃去洗涤液，再进行洗脱，用相当于树脂重量1.2倍的17--18％浓盐水搅拌洗脱2次，头次6小时，二次2小时，收集这两次的洗脱液混合过滤，除去颗粒状杂质；

(6)在过滤后的洗脱液内，加入与洗脱液同体积的95％酒精，搅拌片刻，静态沉淀24小时，抽出上部酒精，收集底部的肝素钠放入瓶内；

(7)将沉淀物倒入小容器内，加入与洗脱液同体积的95％酒精，静置24小时，抽出上部酒精，提取沉淀物放至布氏漏斗中真空，待真空上部开裂时，加丙酮至漏斗中搅拌成糊状，进行脱水，重复3次，置于放有干燥剂五氧化二磷的干燥器内，干燥，得肝素粗品。

本发明的肠粘膜经超声波处理后，可以加速肝素钠与蛋白质的分离，提高肝素钠的收率，经测试，约1000根猪小肠可以提取1公斤，品质符合肝素钠标准。

本发明的有益效果为，具有肝素与蛋白质分解彻底，收率高，废液小，对环境污染小，废液容易处理等优点。

具体实施方式

一、原料D254树脂、新鲜肠粘膜、氯化钠(精盐)、丙酮(试剂级或工业级)、酒精(工业级，含量95％重量)、碱液(工业级，含量30--40％)、五氧化二磷(化学纯)。

二、操作

(一)盐解提取：取新鲜肠粘膜水50公斤(含固体4--6％，约40根猪小肠)，加盐4公斤，倒入反应锅内，加碱液调至PH8.8--9，肠粘膜水用超声波处理3小时，超声波频率为40KHz，功率为40KW；超声波处理后的肠粘膜水升温至60度，保温2小时；然后在40分钟内继续升温至95度，恒温10分钟后出料，捞去上部废液。用90--120目尼龙网布过滤。

滤渣按上述步骤进行两次提取，合并两次滤液。

(二)离子交换：将预处理好的D254树脂2.5公斤，投入温度为55度以内的滤液中，搅拌吸附6小时，提取树脂，弃去滤液，将收集的树脂在清水中洗至中性。

(三)洗涤和洗脱：用相当于树脂重量1.2倍的7％稀盐水搅拌洗涤2次，每次1小时，目的是洗去树脂表面的杂质分子和低分子肝素，弃去洗涤液，再进行洗脱，用相当于树脂重量1.2倍的17--18％浓盐水搅拌洗脱2次，头次6小时，二次2小时，目的是将树脂内吸附的肝素洗脱出来。收集这两次的洗脱液混合过滤，除去颗粒状杂质，待沉淀。洗脱温度应控制在20--25度。

(四)沉淀：在过滤后的洗脱液内，加入相当于洗脱液体积的95％酒精，搅拌片刻，加盖密封，静态沉淀24小时，抽出上部酒精，收集底部的肝素钠放入瓶内。

(五)脱水、干燥：将沉淀物倒入小容器内，加入相当于沉淀物体积的95％酒精，静置24小时，抽出上部酒精，提取沉淀物放至布氏漏斗中真空，待真空上部开裂时，加丙酮至漏斗中搅拌成糊状，进行脱水，重复3次，利用丙酮将肝素中水分脱去。提取块状物，置于放有干燥剂(五氧化二磷)的干燥器内，定时更换干燥剂，直至五氧化二磷不吸水分为止，即得肝素粗品40克，经检测品质符合肝素钠标准，效价在100以上。