[发明专利]一种淡水轮虫通用培养液及其制法

说明书

技术领域

本发明涉及生物培养液，特别是通用的室内淡水轮虫培养液。

背景技术

某些种类的淡水轮虫，如萼花臂尾轮虫(Brachionus calyciflorus)，是国际公认的模式生物，可为室内的种群生态学、分子生物学和生态毒理学研究提供基本的实验材料。由于轮虫是活体受试生物，因而需要在实验室内进行长期的培养，以便得到足够数量的鲜活个体进行实验。淡水轮虫室内培养的关键技术就是轮虫的培养液。目前，大多数的实验室都是用曝气的自来水或过滤的野外池塘水来培养轮虫。但是，以上两种轮虫培养液都存在如下几方面的问题：(一)由于天然淡水缺乏缓冲体系，因而培养液的pH极其不稳定，经常出现大范围的波动；(二)天然淡水中的离子组成和比例常常失衡，某些离子种类偏多，如Ca²⁺，使得培养液的硬度、碱度或氯度偏高；(三)环境污染常导致天然淡水中含有浓度较高的毒性物质(生物毒素、重金属和有机物等)，而这些有毒物质难以通过曝气、过滤以及高温灭菌的方法予以清除；(四)由于环境条件背景值的差异，某一地区的天然淡水其应用具有局限性，无法适用于其他地区采集到的淡水轮虫，不具有通用性。

发明内容

本发明的目的是为了解决以上淡水轮虫培养液中存在的问题，提供一种淡水轮虫通用培养液，适合培养常见的淡水轮虫种类，该培养液稳定性高，无毒无害，且适用的范围较广，提高淡水轮虫的培养质量，降低轮虫培养的风险。

本发明为实现上述目的所采用的技术方案是：一种淡水轮虫通用培养液，pH7.0-7.5的磷酸缓冲液中加入下述各原料：硝酸钾[KNO₃]、七水合硫酸镁[MgSO₄·7H₂O]、六水合硝酸钙[Ca(NO₃)₂·6H₂O]、磷酸氢二钾[K₂HPO₄]、维生素B₁₂、维生素H。

所述pH 7.0-7.5的磷酸缓冲液中按下述重量加入各原料：硝酸钾6-10g/l、七水合硫酸镁3.7-6.2g/l、六水合硝酸钙8.6-11.6g/l、磷酸氢二钾2.4-4.0g/l、维生素B₁₂0.5μg/l、维生素H0.5μg/l。

所述培养液优选按下述配方配制而成：

pH 7.3的磷酸缓冲液

KNO₃            8.0g/l

MgSO₄·7H₂O     4.96g/l

K₂HPO₄          3.2g/l

Ca(NO₃)₂·6H₂O  11.52g/l

维生素H         0.5μg/l

维生素B₁₂       0.5μg/l。

所述培养液优选按下述配方配制而成：

pH 7.3的磷酸缓冲液

KNO₃         10.0g/l

MgSO₄·7H₂O  6.2g/l

K₂HPO₄       4.0g/l

Ca(NO₃)₂·6H₂O 14.4g/l

维生素H        0.5μg/l

维生素B₁₂      0.5μg/l

所述培养液优选按下述配方配制而成：

pH 7.3的磷酸缓冲液

KNO₃              6.0g/l

MgSO₄·7H₂O       3.72g/l

K₂HPO₄            2.4g/l

Ca(NO₃)₂·6H₂O    8.64g/l

维生素H           0.5μg/l

维生素B₁₂         0.5μg/l。