[发明专利]细胞培养的血清调制装置和血清调制方法及细胞培养方法

说明书

本申请是申请日为2004年5月21日、标题为“调制血清用容器及使用该容器的再生医疗方法”的第200480013939.6号中国专利申请的分案申请。 

技术领域

本发明涉及血液容纳容器及使用该容器的血液分离方法以及再生医疗方法。 

背景技术

在再生医疗领域，正在致力于研究将从对象者体内采取的干细胞在体外增殖或分化之后再移植到对象者体内，从而促进对象者的组织再生。干细胞具有分化为各种组织或器官的多分化功能，作为掌握再生医疗的关键的细胞而受到关注。 

在干细胞的体外培养增殖中，对培养基添加血清时非常有效是公知的，但在以治疗人为目的时，因为安全上的问题需要避免使用来源于人以外的动物的血清，因而要求使用利用来源于人、特别是从对象者身上采取的血液调制的血清。并且，与血液检查相比，再生医疗领域中的干细胞的培养需要较多的血清。 

作为调制这种血清的方法，例如，在日本特开2000-000228号公报中披露了使用容纳有玻璃粉末构成的促进血液凝固功能体的方法。 

但是，在日本特开2000-000228号公报中记载的方法中，因为使用以血液检查为目的的小容量采血管，所以，为了调制培养干细胞所需要的量的血清，必须进行多次调制操作，不宜实用。 

另外，关于调制后的血清，在使用之前暂时冷冻或冷藏保存的情况较多。因此，需要从采血管移送到保存用的容器中的作业，如果多次进行该作业则血清极有可能被微生物污染。此外，在这样的采血管中添加血清分离剂的情况多，并且也不能否定杂质从该血清分离剂混入到血清中。因此，从这种安全性和卫生性方面出发，在将人作为对象的再生医疗领域中，不适于使用日本特开2000-000228号公报中公开的方法。另外，在现有的调制血清用的采血管中，在采血管的结构上，难以取出血清以外的成分，并且，因为形成了血饼，所以不能再利用。 

如上所述，需要开发出在培养干细胞时适用于调制大量血清的血清调制容器。 

发明内容

鉴于以上技术问题，本发明的目的在于提供一种适用于在确保高度安全性的同时迅速、且有效地生产大量血清的血液容纳容器以及使用该容器的血液分离方法及再生医疗方法。 

为了达成上述目的，本发明提供一种血液成分分离装置，在来源于血液的液性成分和血小板的存在下，利用凝固活性化作用赋予用于生成可实用的量的血清的血清生成功能。 

在此，所谓“血液”指的是由血球(红血球、白血球、血小板)和作为液体成分的血浆(血清)构成的全血、以及包含这些中的至少一种的液体(例如，用成分献血采取的血液)。并且，所谓“血清”指的是当放置采取的血液时流动性降低、然后从红色的凝固块(血饼)中分离的淡黄色液体。本发明中的“血清”指的是对细胞培养有用的血液中的液性成分，其中，在不从血饼中分离这点上与一般的血清生成方法不同，但其中所包含的凝固因子、增殖因子实质上与一般的血清相同。 

所谓“来源于血液的液性成分”指的是“红血球以外的血液成分”或“在红血球以外的血液成分中添加抗凝固剂等药剂的混合液”。 

所谓“凝固活性化作用”指的是为了从血液中除去凝固因子而使血液中的凝固因子活性化。 

所谓“用于生成可实用的量的血清的血清生成功能”指的是例如可用于培养干细胞程度的量。在干细胞培养中，血清需要培养基的10％左右。因此，优选5(ml)以上至1000(ml)以下，更优选10(ml)以上至600(ml)以下。 

具体提供如下所述的装置。 

本发明提供一种血液成分分离装置，是一种用于将采取的血液分离为多种血液成分并将其容纳的装置，为了调制可作为血清实用的量，在用于贮存所述血液的血液贮存部中，赋予了从所述血液中除去凝固因子的血清生成功能。 

根据上述血液成分分离装置，由于包括血液贮存部，从而可将采取的血液大量地贮存在血液贮存部中。并且，该血液贮存部被赋予了血清生成功能，所以可迅速地使血液中的血小板和凝固因子等 活性化。另外，这些被活性化因子可迅速除去，所以可调制大量血清。并且，该血液成分分离装置优选包括用于容纳从血液中分离的多种血液成分的成分容纳部，该成分容纳部和血液贮存部优选无菌且气密地连接。由此，可在不接触外界气体的情况下进行从采血到调制血清的一系列工序，所以可降低微生物引起污染的风险。 

另外，根据本发明的血液成分分离装置除了可以使用人的血液，还可使用啮齿类、家畜类、灵长类等哺乳类的血液，所以还可以作为非人用血液成分分离装置使用。