[发明专利]一种灵芝菌丝体发酵的新型培养基配方和优化方法

说明书

技术领域

本发明涉及一种灵芝菌丝体发酵的新型培养基配方和优化方法。属生物制 药生产技术领域。

背景技术

真菌入药在我国有悠久的历史，从我国最早的药物书《神农本草经》及以 后的其他许多本草均有记载，如灵芝、茯苓、虫草等等，至今仍广泛应用。大 量药用真菌都富含多种药用或保健功能组分，如多糖、三萜类、糖肽等，它们 在提高人体免疫力、抑制肿瘤、治疗心血管疾病、抗病毒等诸多方面起着重要 的生物活性作用。

灵芝是一种珍贵传统药用真菌，具有双向免疫调节、降血脂、抗衰老和抗 肿瘤等多种作用，这些功能来自于灵芝的多种生物活性物质，灵芝多糖就是其 中的主要成分。灵芝多糖广泛应用在医药、食品等领域，市场需求量与日俱增。

目前，灵芝多糖的生产几乎都是从子实体中提取。由于药用菌子实体生物 活性物质含量和质量受产地环境、栽培基质等影响，导致从子实体中提取活性 成分难度大、生产周期长、成本高等问题。而通过灵芝菌丝体的发酵技术进行 工业化生产，规模化提取灵芝的生物活性功能组分，则为解决以上问题提供了 崭新的途径。

液体发酵技术属于现代生物技术之一。深层发酵技术直接生产食用菌菌体， 同时获得富含氨基酸等营养成分的发酵液。食用菌液体深层发酵技术研究的关 键是培养基。不同食用菌要用不同的培养基进行培养，因此，培养基的选择与 配制是食用菌液体深层发酵技术的关键。培养基配方的合理性，直接影响到发 酵产率和生产成本。

根据培养基组成的不同，可分为天然培养基和合成培养基。天然培养基的 组成均为天然有机物，合成培养基则是采用一些已知化合成分的营养物质作为 培养基，无论哪一种培养基，其组成都离不开碳源、氮源、无机盐、微量元素、 维生素和生长素等。

目前，食用菌的深层液体发酵生产主要是采用了抗生素生产的工艺和设备， 其工艺大致是：母种——一级种子——二级种子——发酵罐深层发酵。药用菌 菌丝体发酵的的培养基的组分结构很大程度上还沿用了氨基酸和抗生素发酵的 配方。灵芝多糖发酵的培养基组分主要由碳源、氮源和无机盐等物质组成，一 些微量因子对灵芝发酵的也有重要作用。目前，研究和生产上灵芝常规的培养 基配方中碳源多为葡萄糖、蔗糖或果糖，氮源为酵母膏、玉米粉或豆饼粉，无 机盐为MgSO₄、K₂HPO₄等。这种常规培养基中的碳源成本较高，微量因子缺乏， 对提高灵芝多糖发酵产量不利。

发明内容

针对现有技术中存在的不足之处，本发明提供一种生产成本较低，微量因 子丰富，营养结构合理的能有效提高灵芝多糖发酵产量的灵芝菌丝体发酵的新 型培养基配方和优化方法。

本发明为达到以上目的，是通过这样的技术方案来实现的：提供一种灵芝 菌丝体发酵的新型培养基配方，各组分最适质量分数为：

苦荞麦0.8％--2.0％，薏苡芢0.5％--2.5％、葡萄糖0.5％--2.0％，黄豆粉0.5 ％--3.0％，酵母膏0.1％--0.5％，磷酸二氢钾0.01％--0.2％，硫酸镁0.01％--0.1％， 水98.08％--89.70％，pH自然。

所述的灵芝菌丝体发酵的新型培养基配方的优化方法是：

1).确定灵芝菌种(Ganoderma lucidum)

2).确定常规培养基的最适配方(配方1)

在先期的试验基础上，选择葡萄糖为碳源，豆饼粉和酵母膏为氮源，以磷 酸二氢钾和硫酸镁为无机盐，通过四因素三水平的正交试验，观察胞外多糖的 产量，进行常规培养基配方选择。

3).确定荞麦培养基最佳配方(配方2)

在配方1的基础上，以苦荞麦粉部分地替代葡萄糖，确定荞麦粉的最适添加 量。

分别以0.1％、0.3％、0.5％、0.8％、1.0％、1.5％、2.0％、2.5％等8个水平 的苦荞麦粉替代葡萄糖，观察随着苦荞麦粉比重在配方中的变化对多糖发酵的 影响，最后确定苦荞麦粉添加量。

4).确定薏苡芢培养基最佳配方(配方3)

在配方1的基础上，以薏苡芢粉部分地替代葡萄糖，确定荞麦粉的最适添加 量。