[发明专利]透明质素合成酶基因及其表达

权利要求书

1.一种产生透明质酸的重组宿主细胞，其中重组宿主细胞是包含重组载体的枯草芽孢杆菌或地衣芽孢杆菌细胞，该重组载体包含编码SEQ ID NO：12所示透明质素合成酶的纯化核酸区段，其中纯化核酸区段是在启动子的控制之下的。 

2.权利要求1的重组宿主细胞，其中纯化核酸区段由根据SEQ ID NO：11的核苷酸序列组成。 

3.权利要求1的重组宿主细胞，其中编码透明质素合成酶的纯化核酸区段是在革兰氏阳性细菌相容性启动子的控制之下的。 

4.权利要求3的重组宿主细胞，其中启动子是芽孢杆菌相容性启动子。 

5.权利要求1的重组宿主细胞，其中枯草芽孢杆菌或地衣芽孢杆菌细胞进一步包含重组载体，该重组载体包含编码酶活性UDP-GlcUA生物合成途径的酶的纯化核酸区段，其中酶活性UDP-GlcUA生物合成途径的酶选自UDP-葡萄糖脱氢酶、UDP-葡萄糖焦磷酸化酶及其组合。 

6.一种生产透明质酸的方法，该方法包含以下步骤： 

将编码SEQ ID NO：12所示透明质素合成酶的纯化核酸区段引入枯草芽孢杆菌或地衣芽孢杆菌宿主中，其中纯化核酸区段是在启动子的控制之下的； 

使宿主在培养基上生长以分泌透明质酸；和 

回收分泌的透明质酸。 

7.根据权利要求6的方法，其中回收透明质酸的步骤包含从培养基中提取分泌的透明质酸。 

8.根据权利要求7的方法，该方法进一步包含对提取的透明质酸 进行纯化的步骤。 

9.一种生产透明质酸的方法，该方法包含以下步骤： 

将编码SEQ ID NO：12所示透明质素合成酶的纯化核酸区段引入枯草芽孢杆菌或地衣芽孢杆菌宿主中，其中纯化核酸区段是在启动子的控制之下的； 

将编码酶活性UDP-葡萄糖脱氢酶的纯化核酸区段引入枯草芽孢杆菌或地衣芽孢杆菌宿主中； 

使枯草芽孢杆菌或地衣芽孢杆菌宿主在培养基上生长以分泌透明质酸；和 

回收分泌的透明质酸。 

10.权利要求9的方法，其中在引入编码酶活性透明质素合成酶的纯化核酸区段的步骤中，该纯化核酸区段由根据SEQ ID NO：11的核苷酸序列组成。 

11.权利要求9的方法，其中编码酶活性透明质素合成酶的纯化核酸区段和编码酶活性UDP-葡萄糖脱氢酶的纯化核酸区段是在相同启动子的控制之下的。 

12.权利要求9的方法，其中编码酶活性透明质素合成酶的纯化核酸区段和编码酶活性UDP-葡萄糖脱氢酶的纯化核酸区段是在不同启动子的控制之下的。 

13.根据权利要求9的方法，其中回收透明质酸的步骤包含从培养基中提取分泌的透明质酸。 

14.根据权利要求13的方法，该方法进一步包含对提取的透明质酸进行纯化的步骤。 

15.权利要求9的方法，其中在将编码酶活性透明质素合成酶的纯化核酸区段引入到枯草芽孢杆菌或地衣芽孢杆菌宿主的步骤中，该编 码酶活性透明质素合成酶的纯化核酸区段是在革兰氏阳性细菌相容性启动子的控制之下的。 

16.权利要求15的方法，其中启动子是芽孢杆菌相容性启动子。 

17.一种产生透明质酸的重组宿主细胞，其中该重组宿主细胞是枯草芽孢杆菌或地衣芽孢杆菌细胞，该细胞包含： 

包含纯化的核酸区段的重组载体，该纯化的核酸区段编码SEQ ID NO：12所示乳房链球菌透明质素合成酶；和 

包含纯化的核酸区段的重组载体，该纯化的核酸区段编码酶活性UDP-葡萄糖脱氢酶的编码区。 

18.权利要求17的重组宿主细胞，其中编码SEQ ID NO：12所示乳房链球菌透明质素合成酶的纯化核酸区段是在革兰氏阳性细菌相容性启动子的控制之下的。 

19.权利要求18的重组宿主细胞，其中启动子是芽孢杆菌相容性启动子。