[发明专利]编码交替蔗糖酶的核酸分子

权利要求书

1.一种编码具有交替蔗糖酶生物活性的蛋白质的核酸分子，其选自：

(a)编码至少成熟形式的蛋白质的核酸分子，所述蛋白质包含Seq.ID No.2所示的氨基酸序列或质粒DSM 12666中所含cDNA编码的 氨基酸序列；

(b)包含Seq.ID No.1所示核苷酸序列或质粒DSM 12666中所含 cDNA的核苷酸序列或相应核糖核苷酸序列的核酸分子；

(c)编码一种蛋白质的核酸分子，该蛋白质的氨基酸序列与Seq.ID No 2所示的氨基酸序列有至少40％的同源性；

(d)核酸分子，其一条链可与如(a)或(b)所述的任一核酸分子杂交；

(e)包含一种核苷酸序列的核酸分子，该核苷酸序列编码由(a)、(b)、 (c)或(d)所述的任一种核酸分子编码的蛋白质之生物活性片段；和

(f)核酸分子，其核苷酸序列由于遗传密码的简并而不同于如(a)、 (b)、(c)、(d)或(e)所述的核酸分子的序列。

2.一种可与权利要求1的核酸分子特异杂交的寡核苷酸或多核苷酸。

3.一种含有根据权利要求1的核酸分子的载体。

4.根据权利要求3的载体，其中核酸分子以有义方向与确保可翻译RNA 在原核或真核细胞中转录和合成的调节元件连接。

5.以保藏号DSM 12666保藏的质粒pAlsu-pSK。

6.用权利要求1的核酸分子或权利要求3或4的载体转化的宿主细胞， 或这种细胞的后代。

7.根据权利要求6的宿主细胞，它是一种微生物细胞。

8.根据权利要求6的宿主细胞，它是大肠杆菌细胞。

9.一种制备具有交替蔗糖酶的生物活性的蛋白质或其生物活性片段的方 法，其中权利要求6-8任一项的宿主细胞在允许蛋白质合成的条件下 培养，从培养的细胞和/或培养基中分离蛋白质。

10.由权利要求1的核酸分子编码的或按照权利要求9的方法制备的蛋白 质或其生物活性片段。

11.一种用权利要求1的核酸分子或权利要求3或4的载体转化的转基因 植物细胞，或这种细胞的后代，其中编码具有交替蔗糖酶生物活性的 蛋白质的该核酸分子受允许可翻译mRNA在植物细胞中转录的调节 元件控制。

12.一种含有权利要求11的植物细胞的植物。

13.根据权利要求12的植物，它是一种有用植物。

14.根据权利要求12或13的植物，它是一种贮糖或贮淀粉植物。

15.根据权利要求12-14任一项的植物的繁殖材料，其含有权利要求11的 植物细胞。

16.一种制备交替糖的方法，其包括从根据权利要求12-14任一项的植物 中提取并分离交替糖的步骤。

17.可从根据权利要求12-14任一项的植物中，从根据权利要求15的繁殖 材料中，或通过根据权利要求16的方法获得的交替糖。

18.一种制备交替糖和/或果糖的方法，其中

(a)权利要求6-8任一项的宿主细胞向含蔗糖培养基中分泌交替蔗糖 酶；和

(b)从该培养基中分离交替糖和/或果糖。

19.根据权利要求18的方法，其中宿主细胞是固定化的。

20.一种制备交替糖和/或果糖的方法，其中

(a)使一种含蔗糖溶液与权利要求10的蛋白质在可使蔗糖转化为交替 糖和/或果糖的条件下接触；和

(b)从该溶液中分离交替糖和/或果糖。

21.根据权利要求20的方法，其中蛋白质固定于一种载体材料上。